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目的:课题通过检测OCT4、SOX2和NANOG三种蛋白在胆囊癌及胆囊良性病变组织中的表达情况,经过统计学检验,分析OCT4、SOX2和NANOG三种蛋白的表达状况和胆囊癌的发生、分化程度和有无远处转移等病理情况之间的联系。 方法:选取2011年10月至2014年02月中,河南科技大学第三附属医院内经外科手术切下的,且经病理学确诊的胆囊癌蜡块和冻存标本各30例作为实验组,另各取30例胆囊良性病变组织蜡块和冻存标本作为对照组,分别应用免疫组化和Western-Blot的方法,检测在胆囊癌和胆囊良性病变组织中OCT4、SOX2和NANOG三种蛋白的表达水平,通过分析OCT4、SOX2和NANOG三种蛋白的表达水平找出与胆囊癌病人临床病理情况的联系。 结果: 1.免疫组化实验结果:(1)在30例胆囊癌患者蜡块组织标本中,OCT4蛋白阳性表达率为83.33%(25/30);在30例胆囊良性病变组织中OCT4蛋白阳性表达率为23.33%(7/30)。其在胆囊癌组中的阳性表达率显著的高于胆囊良性病变组,组间差异有统计学意义(p<0.05)。(2)在30例胆囊癌患者蜡块标本中, SOX2蛋白阳性表达率为76.67%(23/30);在30例胆囊良性病变组织中阳性表达率为20%(6/30),SOX2蛋白在胆囊癌标本中的阳性表达率显著高于其在胆囊良性病变标本中,差异有统计学意义(p<0.05)。(3)在30例胆囊癌患者标本中,NANOG蛋白阳性表达率为86.67%(26/30);在30例胆囊良性病变组织阳性表达率为23.33%(7/30),NANOG蛋白的阳性表达率在胆囊癌标本组中要明显高于良性胆囊病变组,表达差异具备统计学意义(p<0.05)。(4)OCT4、SOX2和NANOG蛋白的表达情况同胆囊癌患者的年龄、性别、肿瘤大小及癌胚抗原(CEA)等均无相关性,但同肿瘤的分化程度、有无淋巴结转移以及肿瘤的 TNM分期呈负相关(p<0.05),即分化越差的、淋巴结转移越多的及 TNM分期越晚患者的胆囊癌组织中,OCT4、SOX2和NANOG蛋白的表达强度越高。 2.Western Blot实验结果:在30例胆囊癌患者和胆囊良性病变组织冻存标本中,OCT4蛋白表达灰度比值分别为1.157±0.440 VS0.561±0.276(p<0.05);SOX2蛋白表达灰度比值分别为1.265±0.698 VS0.654±0.379(p<0.05);NANOG蛋白表达灰度比值分别为1.348±0.745 VS0.752±0.451(p<0.05);OCT4、SOX2和NANOG蛋白在胆囊癌组的表达均显著高于胆囊良性病变组,表达差异有统计学意义。 结论:OCT4、SOX2和NANOG在胆囊癌组织中表达明显增高,且其高表达提示较低的组织学分化和较晚期的TNM分期和较多的淋巴结转移,而其在癌组织内的高表达与患者年龄年龄、性别、肿瘤大小及癌胚抗原(CEA)等均没有明显相关性,三种蛋白的表达与胆囊癌的发生发展可能存在着密切的关系。