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目的:明确手术对Ⅲ、Ⅳ期大肠癌患者免疫功能的影响,筛选术前、术后免疫敏感差异指标;探讨Ⅲ、Ⅳ期大肠癌患者围手术期免疫干预治疗的意义;观察围手术期免疫干预制剂-铜绿假单胞菌对LS-174T大肠癌细胞增殖、侵袭、转移能力的抑制作用及对Ⅲ、Ⅳ期大肠癌患者术后复发、转移及生存期的影响;
方法:1.细胞因子芯片技术检测健康者、大肠癌病人术前及术后血浆标本中免疫相关细胞因子,通过生物信息技术选择免疫敏感差异指标;2.将82例Ⅲ、Ⅳ期大肠癌病人分成免疫干预组44例和对照组38例,Elisa方法检测两组患者术前、术后3日、术后7日免疫指标变化情况;随访观察两年内两组间复发,转移及总生存差异。3.通过肿瘤细胞侵袭实验、集落形成实验、生长抑制实验,观察围术期免疫干预制剂-铜绿假单胞菌对LS-174T大肠癌细胞侵袭,转移、增殖能力的影响。
结果1.芯片筛选结果显示:IL-2、GRO-α、TRAIL-R4、IL-10在健康者、大肠癌患者术前、术后差异显著,具备统计学意义;
2.手术对Ⅲ、Ⅳ期大肠癌患者围手术期细胞免疫功能有明显抑制作用;
3.82例Ⅲ、Ⅳ期大肠癌患者中,实验组(免疫干预组)、对照组术后3日、7日四种免疫指标存在差异,术后7日指标差异明显,具有统计学意义;
4.实验组两年内复发及生存率均优于对照组,但差异尚不具统计学意义,术后两年转移发生率两组间差异显著,P<0.05,具备统计学意义;
5.对照组与实验组间LS-174T细胞透膜侵袭存在明显差异,实验组间随着铜绿假单胞菌制剂浓度增加,LS-174T细胞透膜侵袭能力逐渐降低;
6.100nmol/L铜绿假单胞菌制剂对LS-174T细胞集落形成抑制作用明显,而对照组PBS和50nmol/L P-A对LS-174T细胞集落形成没有明显影响;
7.LS-174T细胞生长抑制试验结果表明:100nmol/L铜绿假单胞菌制剂对LS-174T细胞生长有明显抑制作用,加速LS-174T细胞坏死和凋亡。
结论:1.手术抑制了Ⅲ、Ⅳ期大肠癌患者围手术期细胞免疫功能,是导致部分病人术后复发、转移的危险因素;
2.免疫干预治疗可改善Ⅲ、Ⅳ期大肠癌患者围手术期免疫抑制状态,降低术后复发、转移风险;
3.铜绿假单胞菌制剂对大肠癌LS-174T细胞的增殖、侵袭、转移能力具有显著抑制作用,且这一作用呈剂量依赖性;
4.铜绿假单胞菌制剂可以作为Ⅲ、Ⅳ期大肠癌患者围手术期理想的免疫干预制剂;
5.铜绿假单胞菌制剂免疫干预治疗是否可延长Ⅲ、Ⅳ期大肠癌患者生存期有待远期、大宗病例观察。