目的了解临床分离的阴沟肠杆菌对β-内酰胺类药物的耐药情况,研究阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶的特性及探讨10-23脱氧核酶抑制细菌β-内酰胺酶基因表达效应。方法琼脂二倍稀释法检测药物对59株阴沟肠杆菌临床分离株的MIC,Nitrocefin显色法对阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶进行定性检测,改良三维试验检测AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶。接合传递实验及用特异性超广谱β-内酰胺酶引物对质粒DNA进行PCR扩增,以确定产酶基因的位置及类型,对酶基因进行DNA序列测定,分析同源性并对其进行原核表达, IEF测定酶等电点及紫外分光光度法测定酶水解底物轮廓。设计并合成针对细菌β-内酰胺酶基因的10-23脱氧核酶、反义寡核苷酸,采用氯化钙法将其分别导入表达β-内酰胺酶的大肠杆菌中,观察耐药菌在导入脱氧核酶后在含β-内酰胺类药物的培养基中的生长情况及酶表达量的变化。结果59株阴沟肠杆菌对AMP耐药率最高为80.5%,最低为IMP的3.39%,对其他10种药物的耐药率在20.34%～62.71%。Nitrocefin显色