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目的:通过大鼠椎间盘髓核自吸收实验动物模型,初步探讨大鼠髓核自吸收的机制以及黄芪甲苷、川芎嗪、补骨脂素、青藤碱对其自吸收过程的影响。
方法：
1.探讨大鼠髓核重吸收的机制和观察黄芪甲苷对其吸收过程的影响选择三月龄SPF级SD雄性大鼠150只,随机分为模型组Ⅰ(髓核不暴露组)、模型组Ⅱ、黄芪甲苷组、甲强龙组(均为髓核暴露组)、假手术组,每组10只。其中模型组Ⅰ经手术取出大鼠尾部完整的椎间盘并埋植在其腰背部硬膜外,模型组Ⅱ、黄芪甲苷组及甲强龙组将取出的椎间盘刺破暴露髓核后也埋植在硬膜外,假手术组将线团埋植在同样部位。分别于5d、14d、21d后处死动物取出埋植的椎间盘组织,进行椎间盘重量前后变化的比较,HE染色观察椎间盘形态学改变情况,免疫组化和流式细胞检测法观察T细胞、B细胞和巨噬细胞在椎间盘中的表达。
2.观察川芎嗪、补骨脂素、青藤碱对大鼠髓核吸收过程的影响选择三月龄SPF级SD雄性大鼠50只,随机分为模型组、川芎嗪组、补骨脂素组、青藤碱组(均为髓核暴露组)、假手术组,每组10只。经手术取出大鼠尾部完整的椎间盘并刺破纤维环、暴露髓核后埋植在其腰背部硬膜外,假手术组将线团埋植在同样部位。14天后处死动物取出埋植的椎间盘组织进行HE染色、免疫组化和流式细胞检测。
结果：
1.组织学显示模型组Ⅱ、黄芪甲苷组、甲强龙组椎间盘组织均发生了自吸收现象,HE染色发现各髓核暴露组椎间盘形态学变化较为明显,免疫组化染色及流式细胞术均在其髓核中检测出一定量的炎性因子、VEGF、巨噬细胞和T细胞,在纤维环内侧和髓核外侧发现有新生血管长入现象。其中黄芪甲苷组无论是在形态学变化程度上还是在相关炎性细胞因子表达强度上都较其它组明显,且有统计学意义。模型组Ⅰ未发生自吸收现象,仅在纤维环周围见到少量炎性因子、巨噬细胞和T细胞的表达,且此组髓核内没有相关炎性介质和免疫细胞表的达。
2.川芎嗪组、青藤碱组、补骨脂素组及模型组髓核均发生了重吸收现象,川芎嗪组组织形态学变化较大,椎间盘质量前后变化较其它组大(P＜0.05～0.01)。HE染色发现纤维环变得粗糙、疏松、有部分断裂现象,髓核被包裹皱。免疫组化染色及流式细胞术均在其髓核中检测出一定量的炎性因子、VEGF、巨噬细胞和T细胞,川芎嗪组流式T细胞和巨噬细胞表达量高于模型组和假手术组(其中T细胞P＜0.05)。
结论：
1.大鼠突出椎间盘髓核组织可发生重吸收,此现象的发生主要与新生血管再生,炎性细胞吞噬及髓核引发的自身免疫反应有关,而且黄芪甲苷对髓核重吸收有一定的促进作用。
2.川芎嗪通过抑制血小板聚集、改善移植的椎间盘与外周血液的接触,进而增强VEGF在椎间盘中的表达,增加新生血管长入,促使炎性细胞、吞噬巨噬细胞、T细胞等聚集,从而促进大鼠突出椎间盘髓核的重吸收。