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目的:多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是一种中枢神经系统(central nervous system,CNS)自身免疫介导的炎性退行性疾病,其病灶多发导致临床症状的多样性,可以造成运动、感觉、视觉等功能的异常,常呈现复发缓解的病程。病程的反复发作导致了神经系统损伤累加,严重的降低了患者的生活甚至生存质量,复发率和致残率高。本课题基于前期基础上,研究补肾益髓胶囊及其单体梓醇通过促进转录因子Olig1/2,髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)表达,促进少突胶质细胞前体细胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPC)增殖、分化、迁移的作用机制,为补肾益髓胶囊及其单体梓醇治疗 MS/实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)提供科学依据。方法:动物实验部分以MOG35-55诱导C57BL/6产生EAE,将小鼠随机分为5组:正常组(NC)(n=20),模型组(MC)(n=20),激素(PA 组)(n=20),梓醇组(CA)(n=20),补肾益髓胶囊组(BSYS)(n=20),在病程不同时间点采用透射电镜观察髓鞘损伤修复情况,免疫荧光、观察c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK),MBP,神经元核心抗原(Neuronal nuclei,NeuN)等蛋白表达情况;细胞实验部分通过神经干细胞(neural stem cell,NSC)诱导产生OPC,使用不同浓度时间的2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐(2,2’-Azobis(2-methylpropionamidine)dihydrochloride,AAPH)诱导损伤OPC,选取合适损伤时间浓度的AAPH,建立OPC损伤模型。利用不同浓度梓醇对损伤OPC进行干预,CCK-8法测定细胞存活率,Oligl鉴定及观察OPC突起损伤程度。结果:EAE各组小鼠在从第8天开始发病,发病率为100%,各组发病潜伏期无明显差异。造模各组在15-16天达到高峰,电镜显示,PA组、梓醇组、补肾益髓胶囊组的髓鞘损伤都有不同程度修复。免疫荧光、结果显示,与模型组相比较,经过药物干预后,梓醇组和补肾益髓胶囊,NEUN、MBP在脑内的表达增加,JNK表达减少;NSC在一定条件下可以定向分化成为OPC,和空白对照组(normal control,NC)细胞比较,模型组(model,MO)细胞CCK-8吸光度显著降低,细胞突起率明显减少,Olig1积分光密度显著降低。与MO组比较,不同浓度梓醇均能显著增加OPC细胞的存活率,保护OPC细胞突起,增加Olig1蛋白的表达,其中,以10μM/L浓度梓醇效果最佳。结论:梓醇保护AAPH损伤后的OPC,并且能明显促进OPC细胞增殖。补肾益髓胶囊及梓醇对EAE小鼠具有神经保护作用,并能促进髓鞘再生,其作用机制可能与梓醇及补肾益髓胶囊能够通过减少JNK分泌,增加NeuN、MBP表达,增强OPC增殖,并且促进其向OL分化相关。梓醇及补肾益髓胶囊能够改善EAE小鼠临床症状,降低神经功能评分,促进OPC增殖分化,从而促进髓鞘再生。为补肾益髓胶囊及其单体梓醇治疗脱髓鞘提供了实验数据科学依据。