【摘 要】
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该课题系国家自然科学基金资助项目"利用基因工程改良林可霉素生产菌"中的一部分.林可霉素生物合成基因中的关键基因通过回转化技术已被基本确定.其中包括lmbH在内的若干生产
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该课题系国家自然科学基金资助项目"利用基因工程改良林可霉素生产菌"中的一部分.林可霉素生物合成基因中的关键基因通过回转化技术已被基本确定.其中包括lmbH在内的若干生产基因和lmrA,lmrB,lmrC三个抗性基因.该课题旨在将关键基因单独或与强启动子串联,构建一系列中间质粒,回转化至生产菌S.lincolnensis B48,增加林可霉素生物合成中限速步的基因剂量,并将最终整合到染色体上,从而达到稳定增产,改良菌种的目的.从含有lmbH的重组质粒pESE704,含lmrA,lmrB,lmrC的重组质粒pESS972,pESS823,pESSE890以及含P<,φsl>的重组质粒pMEB14等着手,构建三十余个以E.coli或S.lividans为宿主重组质粒,其中E.coli中的重组质粒主要是用于对基因产物的功能研究以及为在链霉菌中的操作提供合适的中间质粒.重组的链霉菌质粒直接回转化林可霉素生产茵S.lincolnensis B48,初筛后挑选高效价的菌株进行复筛.
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