论文部分内容阅读
1 不同年龄、品种和性别对肌纤维类型分布及候选基因表达的影响 本部分实验选用生长速度慢但肉质较好的中国地方品种猪二花脸，和生长速度快但肉质较差的国外引进品种大白猪作为实验动物，探讨肉质形成过程中肌纤维类型分布及候选基因表达的发育性变化，并进行品种、性别特点的比较。 1．1 肌肉中RNA和DNA浓度的变化 运用紫外吸收法测定肌肉中RNA和DNA浓度，并根据背最长肌的重量计算总的RNA和DNA含量以及RNA／DNA比值。结果表明：RNA、DNA浓度，含量及比值在不同品种或不同性别表现相似的发育性变化规律，DNA浓度随日龄增加而显著下降，但RNA浓度的变化具有阶段性；RNA／DNA比值总的来说随日龄增长而上升，但20-45日龄期间上升滞缓：背最长肌RNA和DNA含量在性别和品种之间存在显著差异，二花脸公猪高于母猪，且随日龄增加差异越明显；大白猪公猪高于二花脸公猪(P＜0.05)，且随日龄增加，差异也越显著。 1．2 肌纤维类型分布的发育性变化 采用Tanabe建立的方法测定背最长肌中Ⅰ、2a、2x和2b四种MyHC mRNA基因的表达，以探讨二花脸猪和大白猪背最长肌中Ⅰ、2a、2x和2b四种肌纤维类型分布的发育性变化。结果表明：出生后3日龄到20日龄，肌纤维类型发生了显著的变化，MyHC Ⅰ型和2a比例下降，2b型肌纤维显著上升(p＜0.05)，且无品种差异；90日龄以后，二花脸公猪背最长肌中MyHC Ⅰ型和2a型的比例均显著高于大白猪，同时，大白猪背最长肌中酵解型肌纤维2b的比例增加迅速，显著地高于二花脸(p＜0.05)；性别间比较，MyHC Ⅰ型纤维的比例无显著差异，90日龄和180日龄，二花脸母猪的MyHC 2b的比例显著高于二花脸公猪(p＜0.05)。以上结果提示：大白猪和二花脸猪背最长肌肌纤维类型的差异主要表现在90日龄后，大白猪Ⅰ型纤维比例的显著下降和2b型纤维比例的显著增加与其肌肉的快速沉积有关；而二花脸猪背最长肌较高比例的MyHC Ⅰ型和2a型纤维与其优良的肉质相关。猪骨骼肌生长及肌纤维类型分布的分子机理研究1.3候选基因表达的发育性变化 用相对定量Rl’- peR方法$lJ定候选基因myostatin，myoge址n，卿on，ealpain3以及PGc一1基因mRNA表达的发育性变化.结果表明:猪背最长肌中myostatin和m尹堆enin，myoD墓因表达在猪出生后早期均较高，品种间比较，两种基因的表达在许多日龄上未出现显著性差异，性别间比较，在性成熟前后myostatin和myogeuln公母间表达有差异;大白猪公猪ca扣 ain3基因的表达与二花脸公猪相比，3日龄到120日龄高于二花脸公猪且在20、90和120日龄时有显著性，性别间比较，无显著性差异;PGC一1基因表达在20日龄、90日龄和180日龄二花脸中显著高于大白猪卜0.05)，二花脸母猪的发育模式在45日龄前与公猪基本相同，90日龄和180日龄二花脸公猪显著高于二花脸母猪印<0 .05).分析表明，猪背最长肌中myostatin、myl棍e苗n和myoD基因表达在猪出生后早期表达上调，可能参与了猪生长早期肌纤维代谢和收缩成熟的调节;calpain3参与肌肉蛋白质的周转，在大白猪的快速生长阶段显著高于相同日龄的二花脸猪;在生长发育的许多阶段上，二花脸猪PGC一1基因的表达都高于相同日龄的大白猪，进一步证明该基因参与氧化型肌纤维分布的形成.2苏太猪肉质个体差异的分子机理 在苏太猪剪切力的极高组和极低组中，I型纤维的比例两组间差异显著(P<0 .05)，Za、Zb和Zx所占的比例均没有显著性差异.Myostatin、myogenin和myoD基因的表达水平在两个极端组之间未出现显著性差异(P>0.05).按照剪切力排列的高、中、低三组中，calPain3基因的表达水平有由低向高逐渐上升的趋势，其中高组与低组间差异显著(P<0 .05)，相关分析表明苏太猪剪切力值与calPain3基因的表达水平呈中等强度的负相关(，一0.38，P<0.05).PGC一1基因的表达水平也有由低向高逐渐上升的趋势，剪切力高组和剪切力低组间PGC一1基因的表达差异显著(P<0.05)，相关分析表明苏太猪背最长肌剪切力值与PGC一1基因的表达成较强的负相关(二一0.65，P<0.01).3重组生长激素对肌纤维类型分布及候选基因表达的影响 本研究采用印GH处理生长期的猪，比较了处理组和对照组中背最长肌以及半健服中各候选基因的表达水平.结果显示:试验组平均日增重提高26.1%(P<0 .05);背最长肌和半健肌myostatin、myogenin mRN^表达无明显变化:半艘肌myoD_.._.__._._】一一一一一一一二丝竺生一一一一mRNA丰度增加82%(p<0.05)，ealpain 3 mRNA丰度增加93%(p<0.01):背最长肌myoD mRNA丰度增加79o’o(P=0.14)，ealpain 3m洲A丰度增加230，0(P=0.11)，半陡肌中PGC一1 mRNA的表达有明显下调的趋势(P=0.16).结果表明，重组猪生长激素能上调肌肉myoD和calPain3的表达，但对背最长肌和半陡肌的调节程度有差别，提示这些基因可能在GH调节骨骼}JL生长的途径中起作用.