鱼类抗菌肽基因的克隆与表达研究

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近年来,在养殖业暴发的大规模的感染性疾病导致了海水鱼类的大量死亡,而抗菌肽被证明是鱼类非特异性免疫的一种主要机制而可能用于对抗感染性疾病。抗菌肽是具有抗菌活性的肽类的总称。目前发现抗菌肽或类似抗菌肽的小分子肽类广泛存在于昆虫、水产动物、两栖类、鸟类、哺乳动物、植物和微生物中。 本实验将彭泽鲫分为两组,感染组和未感染组,其中感染组为嗜水气单胞菌注射感染,培养24h后分别提取两组鲫鱼肝脏总RNA。经过正交试验探索和验证PCR反应条件,选取最佳的条件建立实验方案。然后通过mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)筛选出感染组鲫鱼中特异表达的条带,为后期的割胶回收、纯化差异条带、重组、转化、测序等操作提供了条件。 总之,筛选出的差异条带是一种潜在的可用于治疗和防御细菌感染的新型抗菌肽的基因,可以用基因工程手段构建抗菌肽工程菌,生产替代抗生素的新一代肽类抗菌药。
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