【摘 要】
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论文介绍了乳酸的分类、用途及其发酵方式与生产、产乳酸菌的种类;通过几种乳酸产生菌分别以葡萄糖和木糖为碳源的乳酸发酵,研究其最适发酵条件。从目前的研究水平,通过改变
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论文介绍了乳酸的分类、用途及其发酵方式与生产、产乳酸菌的种类;通过几种乳酸产生菌分别以葡萄糖和木糖为碳源的乳酸发酵,研究其最适发酵条件。从目前的研究水平,通过改变培养条件来得到100%光学纯度的乳酸非常困难。已经有报道通过对pH值、温度、氮源量和糖浓度等因素初始发酵条件的研究,观察乳酸生成菌株的产物光学纯度以及产乳酸量的影响。本实验在几种产乳酸菌最适发酵条件的基础上研究了发酵调控方法,以更高的光学纯度、更低的成本和更大的产物量生产乳酸。通过在发酵前期对底物添加L-乳酸或D-乳酸,分别考察了发酵初期添加乳酸调控对米根霉菌、大肠杆菌、乳酸发酵细菌产物光学纯度的影响。发酵初期在米根霉菌的发酵养培基中添加L-乳酸可以调控提高发酵产物乳酸的光学纯度。随着添加L-乳酸量的增加,所产L-乳酸的光学纯度随之增加,当L-乳酸的添加量≥1.5 g/L时,不再产生D-乳酸。同时,L-乳酸的产量、糖转化率、生物量也随之降低。该调控方法对大肠杆菌发酵调控产D-乳酸纯度没有效果,对乳酸菌调控产L-乳酸光学纯度影响不大。为了提高大肠杆菌的D-乳酸发酵产量,对大肠杆菌W3110进行钴60诱变,通过比较实验挑选出D-乳酸高产菌株。通过基因改造大肠杆菌利用木糖发酵产D-乳酸,提高五碳糖利用率,转化为更多的发酵产物。构建表达大肠杆菌五碳糖代谢的关键基因:木酮糖激酶基因(xylB)、转醛醇酶基因(talA)、转酮醇酶基因(tktA)、木糖异构酶基因(xylA)。
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