大豆GmSPL3基因家族功能初探

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大豆[Glycine max(L.)Merr.]是我国重要的粮食作物,其开花时间和株型是影响产量的重要因素。SPL3基因是SPL(SQUAMOSA PROMOTER BINDING PROTEIN-LIKE,SPL)转录因子家族成员之一,模式植物拟南芥的研究发现microRNA156(miR156)能通过调控SPL基因的表达调控开花时间和株型,且AtSPL3/4/5促进开花。然而,在大豆中GmSPL3的功能尚属未知。因此,研究大豆GmSPL3基因的功能,有利于进一步了解大豆的株型和开花调控的分子机制,为大豆分子设计育种提供重要的基因资源。本研究以大豆为实验材料,通过生物信息学分析,预测GmSPL3在大豆中可能发挥的功能,进一步在大豆Williams82(W82)中,利用CRISPR/Cas9技术对GmSPL3进行基因编辑,获得GmSPL3突变体,进行表型观察与分析,从而研究GmSPL3在大豆开花和株型调控中的功能。研究得出以下主要结果:1.系统进化树和同源序列比对发现GmSPL3的四个拷贝GmSPL3(a,b,c,d)是拟南芥AtSPL3的同源基因,其氨基酸序列相似性达50%以上。对GmSPL3家族保守结构域SBP的位置分析发现均靠近N段,且含有2个锌指结构和一段核定位序列;2.大豆绥农14(SN14)中GmSPL3基因的组织特异性表达分析发现,GmSPL3a在花和茎尖的表达较高,GmSPL3(b,c)在叶中表达较高,GmSPL3d主要在三出复叶和茎尖表达;3.在GmSPL3基因敲除突变体中研究发现,长/短日照条件下,spl3abcd突变体株系的开花表型与野生型W82没有明显差异,而短日照条件下,spl3abcd突变体表现出叶片变小、节数减少、节间距缩短、株高降低的表型,表明GmSPL3在调控大豆植株形态方面发挥重要功能。以上结果表明:GmSPL3是AtSPL3的同源基因,但存在功能分化;在大豆中,GmSPL3不调控开花时间,但参与调控株型。
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