PSS对体外培养血管内皮细胞生长及其与中性粒细胞黏附功能的影响

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目的:旨在通过观察藻酸双酯钠(Polysaccharide Sulfate,PSS)对体外培养正常血管内皮细胞生长情况的影响、检测经或不经PSS处理缺氧复氧(Hypoxia/Reoxygenation H/R)血管内皮细胞分泌细胞间黏附分子-1(Intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)水平的变化、观察经或不经PSS处理的H/R血管内皮细胞与健康人中性粒细胞(Polymorphonuclear leucocytes,PMN)的黏附情况以及观察PSS治疗前后脑梗死病人PMN与血管内皮细胞黏附性的变化,探讨PSS对血管内皮细胞和中性粒细胞黏附功能的影响,从而进一步阐明PSS治疗缺血性脑血管病的作用机制。 方法:体外培养人类脐静脉血管内皮细胞(HUVEC-304),分别经50、100、150、200、250μg/ml不同终浓度PSS处理或不经PSS处理(PSS终浓度为0μg/ml)后,采用MTT法观察PSS对各组血管内皮细胞的生长情况;建立血管内皮细胞H/R模型,经50、100、150、200、250μg/ml不同终浓度PSS或不经PSS处理,测定各组细胞培养液中可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)的浓度,检测各组血管内皮细胞和健康人PMN的黏附率,从中选取对细胞黏附功能影响最大的PSS终浓度。选取确诊急性脑梗死患者60例,随机分为PSS治疗组(常规治疗+PSS静脉滴注)和非PSS治疗组(常规治疗),每组30例,分别检测两组病人治疗前后其PMN与经PSS处理(PSS终浓度为150μg/ml)的体外培养H/R血管内皮细胞的黏附率,并与健康对照组比较。 结果:PSS终浓度为50、100、150、200μg/ml的体外培养的各组正常血管内皮细胞活力(吸光度分别为0.663±0.039、0.902±0.049、0.757±0.029、0.708±0.058)高于未经PSS处理的对照组(吸光度为0.558±0.033),差异有显著性(P均<0.01),其中PSS终浓度为100μg/ml组尤为明显。经PSS终浓度为100、150、200μg/ml处理过的各个实验组,其H/R血.管内皮细胞同健康人PMN的黏附减少,且培养液中sICAM-1的浓度低于对照组,差异有显著性(P<0.01),其中PSS终浓度为150μg/ml组尤为明显,与其它实验组及对照组比较,差异有显著性(P<0.01)。急性脑梗死患者PMN与体外培养H/R血管内皮细胞(经PSS终浓度150μg/ml处理或未处理)的黏附率高于健康对照组,差异有显著性(P<0.01)。PSS治疗组和非PSS治疗组两组脑梗死病人,治疗前其PMN与H/R血管内皮细胞(经PSS终浓度150μg/ml处理)黏
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