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栓皮栎(Quercus variabilis Bl)是我国传统的特有经济树种,也是我国最重要的软木资源。由于栓皮栎用传统的无性繁殖方法繁殖困难,因此开展成龄栓皮栎优良无性系组培繁殖技术研究具有重要的意义。本文以成龄栓皮栎枝条萌发的幼嫩茎段为材料,研究了组培繁殖过程中无菌苗的建立、基本培养基的筛选、外源激素配比及其浓度、生根培养、愈伤组织诱导分化等,同时对过氧化物同工酶进行了分析。具体结果如下: (1)外植体的最适采取时间是3 月上旬母株萌发的嫩枝;在培养基中添加0.5mg.L-1PVP 可有效的抑制初代培养中出现的褐变现象。(2)在起始培养时,WPM 培养基中的外植体萌发率高于BTM、GD 的萌发率。培养基中添加6-BA比ZiP效果好。其中0.2mg.L-16-BA对其始外植体茎芽的增殖和生长比较有利,高浓度6-BA(0.4～0.8mg.L-1)对茎芽伸长有一定的负面影响,表现为形态异常,高度愈伤化。 (3)在增殖培养时,培养基中单独添加IAA 或与6-BA 配合使用均有利于茎芽的增殖和伸长。 (4)采用固—液双相培养基对茎芽的增殖和伸长生长有很明显的促进作用。表现为植株生长健壮,愈伤组织分化率较低,面积较小。(5)在生根培养中,1/4MS 添加20g.l-1 蔗糖生根效果最好。(6)愈伤组织诱导的最适培养基为1/2MS和WPM,最适培养条件为暗培养。不同外植体对愈伤组织诱导率的影响差异显著,胚、胚根的诱导率明显高于叶片和茎段。KT和2,4-D配合使用较适合不同外植体愈伤组织的诱导。本试验中未从愈伤组织诱导出芽、不定根。通过细胞学观察,未发现内生芽器官,仅观察到多核细胞的现象。(7)不同基因型的POD同工酶谱具有各自的特异性。不同无性系,不同部位,不同培养条件下,B区两条带一直存在,颜色很深,说明编码它们的结构基因在整个周期中始终处于活跃的表达状态,且不受环境条件的影响。