苦瓜抗白粉病基因的分子标记筛选及初步定位

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苦瓜(Momordica charantia L.)属于葫芦科苦瓜属植物,有着丰富的营养成分,普遍菜药兼用,深受人们喜欢而广泛种植,但是苦瓜容易受到白粉病等危害,导致苦瓜产量和品质严重降低。因此,为了从根本无公害化解决苦瓜白粉病问题,本研究以苦瓜高抗白粉病的野生材料MC18和高感白粉病的苦瓜栽培种MC1-2构建F2代分离群体,通过对F2代单株抗病性鉴定后,构建高抗和高感白粉病苦瓜近等基因池,利用SRAP和SCAR分子标记技术筛选与抗白粉病P. xanthii生理小种1的分子标记,同时在构建苦瓜分子连锁图谱后,将苦瓜抗白粉病基因初步定位到图谱上。通过研究,我们得到了以下结果:(1)通过利用高感白粉病的苦瓜亲本MC1-2和高抗白粉病的苦瓜亲本MC18来构建各世代群体后,经过对亲本及各世代单株抗P.xanthii生理小种1的鉴定、观察和统计,苦瓜对P.xanthii生理小种1的抗性是由一对单隐性基因控制。(2)本研究优化得到的SRAP-PCR体系(20μL:DNA5ng/μL、dNTPs0.05mmol/L、Mg2+2.5mmol/L、引物0.6μmol/L、Taq DNA聚合酶0.088U/μL)生已知的SRAP-PCR扩增程序下可从苦瓜F2代分离群体抗感白粉病单株的基因组DNA混合池和黄瓜中分离出差异条带,适合于苦瓜和黄瓜抗白粉病的SRAP分子标记的筛选。(3)通过两轮以不同的DNA模板来进行SRAP引物筛选,第一轮从1188对引物组合中,筛选出121对引物组合,第二轮从初步筛选出的121对引物组合中筛选出11对引物组合,对从近等基因DNA混合池中筛选出苦瓜抗白粉病基因的分子标记提供了引物保障。(4)获得了苦瓜抗P. xanthii生理小种1基因的SRAP分子标记5个,而且将1个成功转化成实用的SCAR标记;(5)获得了一张苦瓜分子遗传连锁图谱,并根据筛选得到的相关分子标记将苦瓜抗P. xanthii生理小种1基因初步定位到分子遗传图谱上。
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