类胡萝卜素是植物中重要的色素之一，具有广泛的生物功能。它是组成光合系统的重要部分，能够保护光合系统免受强光氧化破坏，同时使植物的果实、根、叶和花呈现丰富多彩的颜色，提高了植物的观赏价值。天然类胡萝卜素对人体健康起着重要作用，其中β-胡萝卜素是强抗氧化剂，能够增强免疫力，降低感染性疾病的发病率和死亡率，有效抑制肿瘤、癌症的等疾病发生，还能维持正常生殖能力。此外，β-胡萝卜素还是V_A的重要来源。因此，寻求富含β—胡萝卜素的天然食品或用科学技术开发富含β—胡萝卜素的食品越来越受人们的重视。 番木瓜果实营养丰富，含有多种类胡萝卜素，是一种上等的保健果品，同时还在工业、食品、医药等方面具有广泛的用途。本试验以红肉番木瓜“漳红”品种为材料，进行β-胡萝卜素合成途径相关基因的克隆研究，以期为研究番木瓜和其它果树β-胡萝卜素生物合成途径打下基础。主要试验结果如下： (1) 建立了较为完善的番木瓜样品总RNA提取和纯化方法。通过比较Trizol、改良Trizol、CTAB、异硫氰酸胍四种RNA提取方法，总结出适应番木瓜样品RNA提取的方法——改良Trizol法。并通过此方法获得了较为纯净的、完整的总RNA，可以直接用于后续的RT-PCR和RACE反应。 (2) 采用PCR扩增获得β-胡萝卜素合成途径系列酶基因的保守序列。以番木瓜果皮总RNA逆转录的cDNA为模板，用扩增同源序列的简并引物，PCR扩增出PSY、PDS、ZDS 3个系列酶基因的保守序列，长度分别为422 bp、599 bp、797 bp。 (3) 采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得了PSY cDNA序列。PSY cDNA全长1744 bp，包含一个1320 bp的开放阅读框，编码438个氨基酸残基。其推导的氨基酸序列与拟南芥、葡萄柚、番茄、万寿菊等植物的氨基酸序列同源性分别达85％、76％、73％、79％。 (4) 采用RACE技术获得ZDS 3’序列。将该3’序列与先前获得的保