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目的:探讨瑞芬太尼后处理对脑缺血再灌注后大鼠认知功能和大鼠脑海马神经元凋亡的影响,并从全脑缺血再灌注损伤后凋亡的机制角度探讨其影响的可能作用机制,为临床麻醉及危重病人的麻醉药物选择提供实验及理论的依据。 方法:36只♂SD大鼠,体重250~300g,(由安徽医科大学动物中心提供)。把大鼠随机的分为6组(n=6):假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、瑞芬太尼后处理低剂量组(RPOC1组)、瑞芬太尼中剂量组(RPOC2组),瑞芬太尼高剂量组(RPOC3组)和缺血后处理组(POC组)。本实验采用分离夹闭双侧颈总动脉10min合并低血压法建立全脑缺血/再灌注(I/R)模型。假手术组大鼠仅分离出大鼠双侧的颈总动脉,并在其下放置丝线,在实验并不阻断颈总动脉的血流。模型组大鼠分离出双侧的颈总动脉,阻断其血流合并低血压(30-35mmHg),维持10min,然后开放颈总动脉,并将血压升至正常。瑞芬太尼后处理组分别于再灌注前的5min以瑞芬太尼0.2、0.6和1.8μg/kg.min速率经尾静脉泵注。POC组在脑缺血10min后行3个循环10s的缺血/再灌。大鼠实验完成再灌注后72h,利用Morris水迷宫试验和大鼠跳台实验测量大鼠学习和记忆的能力。在完成以上实验后,断头取脑,制作脑组织切片,并采用HE染色观察海马CA1区锥体细胞大体情况,同时用免疫组织化学方法检测海马CA1区Caspase-3蛋白的表达和Tunel法检测海马CA1区锥体细胞凋亡情况。采用RT-PCR法测定大鼠脑海马Caspase-3基因的表达情况。 结果:与SH组相比,Model组大鼠学习记忆能力明显下降,并且脑海马CA1区caspase-3阳性细胞数及凋亡神经元计数明显增多(P<0.05)。在瑞芬太尼中剂量组和高剂量组中大鼠在水迷宫和跳台实验中的学习记忆能力明显高于模型组的成绩(P<0.05)。并且与模型组相比,瑞芬太尼中、高剂量组脑海马CA1区caspase-3表达的阳性细胞数和Tunel染色阳性细胞数也明显低于模型组(P<0.05),并且与模型组相比,瑞芬太尼中、高剂量组脑海马Caspase-3基因的表达量也明显减少(P<0.05)。 结论:脑缺血再灌注后可以降低大鼠的学习记忆能力,而中,高剂量瑞芬太尼后处理可减轻短暂脑缺血再灌注对大鼠学习记忆的损伤。瑞芬太尼后处理产生脑保护的机制,可能与下调脑缺血再灌注后大鼠脑海马CA1区锥体细胞caspase-3的表达,并且减少神经细胞凋亡有关。