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本室研究生谢安新(2004)构建了鸡新城疫F基因(pcDNA3.1/F)真核表达质粒，温纳相(2003)构建了鸡白介素18基因真核表达质粒(pcDNA3.1/chIL-18)，并曾进行pcDNA3.1/F对鸡的免疫试验，具有一定的近期免疫保护效果，pcDNA3.1/chIL-18则具有提高pcDNA3.1/F的免疫保护作用。
为进一步提高pcDNA3.1/F的免疫效果及pcDNA3.1/chIL-18的分子佐剂作用，本研究参考最近相关研究报告，选用来源方便，安全，经济的普通佐剂磷酸铝和司苯-甘油，探讨它们提高pcDNA3.1/F免疫效果和pcDNA3.1/chIL-18的分子佐剂效果作用及其机理。试验在用PCR、酶切鉴定pcDNA3.1/F和pcDNA3.1/chIL-18保存良好的基础上，大量提取质粒pcDNA3.1/chIL-18和pcDNA3.1/F，并进行含量测定；加入适量磷酸铝和司苯-甘油制备混合疫苗，使每头份0.2ml混合疫苗中含pcDNA3.1/F200μg、pcDNA3.1/chIL-18200μg、磷酸铝40μl、司苯-甘油100μl。
将鸡随机分为15组，每组10～12只，于7d龄分别肌注C30疫苗，pcDNA3.1/F，pcDNA3.1/F+pcDNA3.1/chIL-18，pcDNA3.1/F+磷酸铝，pcDNA3.1/F+pcDNA3.1/chIL-18+磷酸铝，pcDNA3.1/F+司苯-甘油，pcDNA3.1/F+pcDNA3.1/chIL-18+司苯-甘油，生理盐水；21d龄给第8组到15组进行2免，二免疫苗剂量和一免相同。以上15组均分别于7、14、21、28、35d龄采血，分离血清及淋巴细胞，分别用HI检测其抗体水平，以淋巴细胞转化试验(MTT)方法检测T细胞转化率。35d龄则用30LD50的NDV强毒进行攻毒保护试验。
试验结果表明：pcDNA3.1/F+磷酸铝+pcDNA3.1/chIL-18经过二次免疫鸡的近期攻毒保护率达到8/11(72.7％)，pcDNA3.1/F+司苯-甘油+pcDNA3.1/chIL-18的二次免疫鸡的近期攻毒保护率达9/12(75％)，虽未达到传统疫苗C308/9(88.9％)、ND灭活疫苗12/12(100％)的保护率，但比只用pcDNA3.1/F的4/12(33.3％)，及用pcDNA3.1/F+pcDNA3.1/chIL-18的6/12(50％)的保护率有了进一步明显的提高。表明这两种传统佐剂有提高NDVF基因疫苗免疫作用，也有提高pcDNA3.1/chIL-18的分子佐剂效果。
本试验结果综合表明司苯-甘油和磷酸铝佐剂与pcDNA3.1/chIL-18真核表达质粒有协同增强pcDNA3.1/F免疫效果的作用，两者中司苯-甘油的作用效果更好，其作用机理是既提高了机体的细胞免疫水平，又提高了机体的体液免疫水平，具有继续深入研究、应用的前景。