蓝莓花色苷的分离纯化及其初步药效学实验研究

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蓝莓是近几年来世界上发展最为迅速的集营养与保健于一身的新兴果品,它具有防止脑神经老化、强心、抗癌、软化血管、增强人机体免疫力等多种功能。而其中所含的花色苷类物质对视疲劳的防治作用目前更是倍受关注。本文以蓝莓花色苷为研究对象,对蓝莓花色苷的提取、纯化、稳定性和药理药效活性为研究重点,为进一步研究或开发具有防视疲劳功能保健食品或药品提供一定的理论依据。通过实验研究,获得了以下几个方面的结论:1、蓝莓花色苷的提取工艺研究:在提取过程中,温度、醇浓度、料液比、时间这四个因素对花色苷含量均有一定影响。影响的主次顺序分别为醇浓度>温度>时间>料液比。醇浓度对花色苷的含量影响是极显著的,温度和时间的影响是显著的,而料液比的影响是不显著的。最终优化出的提取方案为温度50℃,料液比1:10,提取时间1h,醇浓度75%。2、蓝莓花色苷适合用聚酰胺树脂进行纯化,乙醇溶液洗脱。纯化条件为:花色苷粗提物上柱后,先用蒸馏水洗脱4个柱体积,然后用50%乙醇洗脱6个柱体积,收集该部分洗脱液,干燥,便为精制的花色苷。通过差异pH法进行测定,所得的花色苷的纯度为46.45%,色价为2047,达到了国际上规定的花色苷类物质医药用品原料含量大于20%,天然色素色价大于40的相关规定。3、花色苷稳定性研究:研究表明花色苷在酸性条件下是比较稳定的,而在碱性条件下是极不稳定的;花色苷在温度小于60℃的条件下较为稳定,当温度大于80℃时,温度对花色苷有较明显的降解作用;光对花色苷的稳定性影响很大,因此,花色苷在保存和使用过程中,应该尽量避免强光直照;花色苷的抗氧化还原能力很差,因此,应该注意防止氧化,避免和还原剂一起使用;NaCl、蔗糖和防腐剂对花色苷的稳定性影响不大,在加工过程中可以放心使用。4、蓝莓花色苷对细胞的氧化损伤研究:用15μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的蓝莓花色苷预先处理过的ECV-304细胞与H2O2损伤组相比,细胞存活率由损伤组的19.09%分别上升至38.67%、68.97%、79.00%和61.10%,具有极显著的差异。该结果说明蓝莓花色苷在这4个浓度对细胞的氧化损伤具有明显的保护作用,因此具有开发成抗视疲劳保健食品和药品的潜力。
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