本研究在课题组已有的杉木分子木材形成的分子生物学研究基础上,利用RNA原位杂交技术对扩展蛋白基因ClEXP2在茎段组织中的表达进行了空间定位。主要结果如下:1.用杉木基因型020的当年生茎段为实验材料,制作石蜡切片。结果显示组织切片清晰完整。2.本研究中,用NBT/NCIP显色法对石蜡组织切片中内源性碱性磷酸酶进行检测显示,被检组织具有高丰度的蓝紫色斑点,且集中分布于髓、韧皮部和皮层中。这说明在本实验的活体组织切片中内源性的碱性磷酸酶具有活性,必须在原位杂交实验中进行内源性碱性磷酸酶的封阻。3.通过设计5’端加有酶切位点的特异引物扩增得到CLEXP2基因的280bp特异序列,构建至含有T7启动子的T载体,经线性化处理阳性克隆质粒,并以此为模板,合成了带有地高辛标记的CLEXP2基因mRNA反义探针。4.在用CLEXP2基因mRNA反义探针进行反复的原位杂交实验中发现,仅在实验组中检测到反义探针所具有的杂交信号,呈蓝紫色斑点零散分布于髓、形成层、韧皮部和皮层。本文RNA原位杂交试验体系和初步研究结果,为杉木形成层细胞的次生生长中扩展蛋白基因表达模式提供了有用的信息。