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目的：探究酒精对人肝L02细胞的损伤作用及细胞损伤过程中Nrf2通路和p62蛋白变化情况，分析在此过程中Nrf2通路所发挥的作用及其与p62蛋白的关系。 方法：MTT法检测酒精对L02细胞增殖抑制作用；DAPI染色观察酒精对L02细胞细胞核形态的影响；DCFH-DA染色荧光显微镜观察和流式细胞术测定经酒精处理后L02细胞内活性氧含量变化；比色法检测酒精对L02细胞内谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响；羟胺法测定L02细胞内超氧化物歧化酶活性改变；间接免疫荧光法观察经酒精处理后L02细胞内Nrf2蛋白分布及p62蛋白表达量的改变；蛋白免疫印迹法（Western-Blot）检测经酒精处理后L02细胞内p62蛋白及胞质内和胞核内Nrf2蛋白的表达量。 结果：（1）处理组培养基为酒精浓度分别为0 mmol/L、100 mmol/L、200 mmol/L、400 mmol/L和800 mmol/L的去血清培养基，对照组培养基含血清不加酒精，处理时间为24h，与酒精浓度为0 mmolL组比较，细胞生存率显著降低，分别是63.04%（P＜0.01）、54.26%（P＜0.01）、28.55%（P＜0.01）和19.36%（P＜0.01）；DAPI染色观察L02细胞经酒精处理后对细胞核形态的影响，结果显示随酒精浓度增加细胞出现凋亡的特征性改变。 （2） DCFH-DA染色显示，L02细胞内活性氧含量随酒精浓度增加显著增多；流式细胞术定量测定细胞内活性氧含量，与酒精浓度为0 mmolL组比较，在酒精浓度为100 mmol/L、200 mmol/L和400 mmol/L时，DCFH-DA的显色比例明显增多；同时将L02细胞经200 mmol/L酒精处理不同时间，流式细胞术测定细胞内活性氧含量，结果显示随着酒精作用时间延长，L02细胞内活性氧含量与对照组比较明显减少。 （3） 间接免疫荧光观察酒精对L02细胞内Nrf2蛋白在胞质内和胞核内分布的影响，结果显示随酒精浓度增加L02细胞内Nrf2核转位增多；间接免疫荧光观察酒精对细胞内p62蛋白表达量的影响，结果提示经酒精处理后，L02细胞内p62蛋白表达量显著增多；Western-Blot结果显示：L02细胞内p62蛋白和核内Nrf2蛋白表达量随酒精浓度增加和作用时间延长明显增多，而胞质内Nrf2蛋白表达量则降低。 （4） 比色法测定细胞内谷胱甘肽过氧化物酶活性，结果显示在酒精浓度为100mmol/L、200 mmol/L和400 mmol/L时，细胞内谷胱甘肽过氧化物酶活性分别为2411.18 U（P＜0.05）、3361.57 U（P＜0.01）和3636.08 U（P＜0.01）；处理时间在3 h、6 h、12 h和24 h时，细胞内谷胱甘肽过氧化物酶活性分别为2453.19 U（P＜0.01）、2917.22 U （P＜0.01）、3195.81 U（P＜0.01）和3360.42 U（P＜0.01）；羟胺法测定L02细胞内超氧化物歧化酶活性，结果显示在酒精浓度为100 mmol/L、200 mmol/L和400 mmol/L时，细胞内超氧化物歧化酶活性分别为129.02 u/mgprot（P＜0.05）、141.32 u/mgprot（P＜0.01）和160.51 u/mgprot（P＜0.01）；处理时间在3 h、6 h、12 h和24 h时，细胞内超氧化物歧化酶活性分别为128.37 u/mgprot（P＜0.01）、141.43 u/mgprot（P＜0.01）、159.90 u/mgprot （P＜0.01）和192.24 u/mgprot（P＜0.01）。 结论：酒精显著增加L02细胞活性氧含量，造成细胞生存率下降。在此过程，细胞内Nrf2核转位和p62表达量显著增加，诱导细胞内超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性增强，对细胞有保护作用。