Pygopus(Pygo)是近年来发现的Wnt信号通路的新组分。在哺乳动物中Pygo有两个同源基因：Pygo1和Pygo2，后者的分布较为广泛。PYGO2蛋白定位于细胞核内，它有两个结构域，分别是位于C-端的PHD锌指结构域和位于N-端的NHD结构域。PYGO2通过PHD结构域与BCL9和β-catenin构成复合体，共同促进转录因子TCF对Wnt靶基因的转录激活。Pygo2NHD结构域的功能尚不明确，有研究者认为它具有转录激活作用。近期研究显示，在哺乳动物中Pygo2可能还介导Wnt非依赖性的信号转导。 串联亲和纯化技术(TAP)是在目的蛋白一端导入两个特异性的蛋白标签，经过两步亲和纯化，获得在生理条件下与目的蛋白相互作用的蛋白质，随后用质谱技术进行鉴定。它集合了亲和纯化和免疫共沉淀两种技术的优点，可以获得高纯度、高浓度的目的蛋白复合物，简便快捷。 本研究利用串联亲和纯化和质谱联用的方法，从稳定表达外源性PYGO2蛋白(带ProtA和CBP标签)的DLD-1结肠癌细胞中，分离得到两个与PYGO2相互作用的新蛋白：MED12(Mediatorof RNA polymerase Ⅱ transcription subunit 12)和PIK3C2A(Phosphatidylinositol-4-phosphate 3-kinase C2 domain-containing alphapolypeptide)。进一步的免疫共沉淀实验证实，PYGO2通过NHD结构域与MED12结合。随后的荧光素酶实验显示，MED12过表达或用siRNA阻遏MED12蛋白表达，对Pygo2NHD结构域的转录激活活性均无明显影响；而当用siRNA阻遏MED12蛋白表达时，Pygo2PHD结构域的转录激活活性显著增强，这暗示MED12可能会阻抑PHD结构域的转录激活活性，而这种活性很可能与染色质重塑有关。