【摘 要】
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目的:目的：通过RNA测序技术研究不同低温暴露条件下大鼠施万细胞的表达谱,研究低温刺激对施万细胞信号传导的影响,以便探索低温刺激与贝尔麻痹发病机制的关联性,为临床探寻贝尔麻痹的治疗提供新思路。方法:施万细胞在37℃的正常培养温度和30℃,20℃和10℃的低温下培养分别培养8小时,然后用RNA测序技术对其基因组进行测序。随机选取4个在不同培养条件下差异表达的基因,通过qRT-PCR对RNA-seq准
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目的:目的：通过RNA测序技术研究不同低温暴露条件下大鼠施万细胞的表达谱,研究低温刺激对施万细胞信号传导的影响,以便探索低温刺激与贝尔麻痹发病机制的关联性,为临床探寻贝尔麻痹的治疗提供新思路。方法:施万细胞在37℃的正常培养温度和30℃,20℃和10℃的低温下培养分别培养8小时,然后用RNA测序技术对其基因组进行测序。随机选取4个在不同培养条件下差异表达的基因,通过qRT-PCR对RNA-seq准确性进行验证。通过topGO 2.24.0,cluster Profiler 3.0.5,Cytoscape 3.7.2软件对差异表达基因进行GO和KEGG富集分析,PPI互作网络分析。结果:与37℃对照组相比,在30℃组、20℃组和10℃组总共发现1455个（260个上调,1195个下调）、2815个（739个上调,2076个下调）和2514个（1010个上调,1504个下调）差异表达基因。在30℃组GO富集分析中,显著下调的DEGs主要集中在CC术语,显著上调的主要集中在BP术语。与30℃组相比,20℃和10℃组的DEGs主要集中在BP和CC术语,包括膜结合细胞器,细胞内成分和细胞器。利用网络分析工具cyto Hubba筛选出10个核心基因,30℃组的核心基因包括Eprs、Hspa5、Gart、Mthfd1、Hspa1a、Pdia4、Pdia5、Sod2、Dnajc3、Txndc11,20℃组的核心基因包括Mcm5、Mcm7、Mcm4、Mcm3、Cdc6、Pcna、Mcm2、Mcm6、Rrm1、Rad51,10℃组的核心基因包括Mcm5、Mcm3、Mcm2、Mcm4、Cdc6、Pcna、Mcm7、Cdk2、Mcm6、Rrm1。KEGG富集分析显示,大多数DEGs可以显着富集于与信号转导相关的通路（30℃组:磷脂酰肌醇信号传导系统;20℃组和10℃组TNF信号通路）。结论:30℃时ITPR1的下调影响PI信号通路,Hspa5和Hyou1等基因上调影响内质网的蛋白质加工通路。此外与紧密连接和粘附连接功能相关的PMP22、TJP1、Claudin12和Claudin15下调,这些通路与基因的功能紊乱影响神经传导,这可能是冷暴露后导致贝尔麻痹发生的关键因素。20℃与10℃冷暴露时施万细胞与信号转导相关的TNF信号通路功能障碍,且10℃时施万细胞大量凋亡。表明30℃的冷暴露条件在贝尔麻痹的病因研究中更具有研究意义。分析冷暴露对施万细胞信号传导机制的影响,将有助于促进对其具体发病机制的认识,为今后治疗贝尔麻痹提供依据。
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