【摘 要】
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该研究首先利用全反式维甲酸(All-trans retinoic acid,ATRA)诱导孕鼠,探讨ATRA诱导马蹄内翻足样畸形的最佳剂量,建立稳定的马蹄内翻足动物模型,为深入研究马蹄内翻足发病机
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该研究首先利用全反式维甲酸(All-trans retinoic acid,ATRA)诱导孕鼠,探讨ATRA诱导马蹄内翻足样畸形的最佳剂量,建立稳定的马蹄内翻足动物模型,为深入研究马蹄内翻足发病机制提供物质基础;同时选择正常Wistar大鼠胚胎肌组织蛋白质组进行双向电泳分析,建立胚胎肌组织双向电泳技术平台;随后利用双向电泳分离模型鼠及正常鼠肌肉蛋白质组,比较模型与正常对照蛋白质点的差异,通过质谱测定结合生物信息学手段鉴定差异蛋白,为马蹄内翻足的研究提供基础资料.结论通过全反式维甲酸诱导,建立了马蹄内翻足大鼠胚胎模型,孕10天给药,最佳诱导剂量为135 mg/kg.模型鼠足踝病理改变与人类马蹄内翻足有较好的一致性.畸形鼠脊髓、椎骨和胫骨后肌群细胞凋亡明显.首次应用双向电泳技术获得了重复性好的孕21d胎鼠肌组织蛋白质组二维图谱,能满足蛋白质点分析鉴定需要.首次分析了马蹄内翻足模型鼠与正常胎鼠胫骨后肌群蛋白质组差异.模型鼠存在部分蛋白点缺失,部分蛋白额外表达.另有一些蛋白点表达明显上调或下调.经质谱和生物信息学分析确认,模型鼠肌组织慢骨骼肌肌钙蛋白T缺失,X连锁凋亡蛋白抑制因子下调,羧酸酯酶AY034877额外表达,可能与马蹄内翻足畸形相关.
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