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目的:
探讨抗氧化蛋白Prx1在尼古丁诱导的口腔鳞状细胞癌(Oral squamous cellcarcinoma,OSCC)中的表达及作用机理,为OSCC发病机理研究提供实验依据,有望为OSCC治疗提供新的靶点。
方法
采用MTT、DCFH-DA荧光探针、RT-PCR、Western blot、免疫荧光等方法检测在尼古丁诱导的OSCC细胞株Tca8113细胞中ROS的含量及Prx1、NF-κB、GSTπ、HO-1等基因的表达情况。
结果
1.Tca8113细胞较口腔癌前病变细胞株DOK细胞内的ROS含量明显增高(p<0.05)。不同浓度尼古丁(0.1μM、1μM、10μM、100μM)处理Tca8113细胞24h,实验组与对照组相比,其ROS含量明显增高(p<0.05)。
2.不同浓度尼古丁(0.1μM、1μM、10μM、100μM)分别处理Tca8113细胞48h,及同一浓度尼古丁(1μM)分别处理Tca8113细胞24h、48h、72h,各实验组与对照组相比,Prx1、GSTπ、HO-1表达增高(p<0.05); NF-κB从胞浆内向胞核中转移。
3.尼古丁处理Tca8113细胞较短时间(24h、48h)、较低浓度(0.1μM、1μM、10μM)可促进细胞生长,且呈浓度依赖性;尼古丁浓度增高(100μM)或时间延长(72h)时,抑制细胞生长(p<0.05)。
结论
Prx1在尼古丁诱导的OSCC细胞中具有一定的抗氧化作用,可能是通过Prx1/NF-κB信号通路发挥作用的。Prx1有望成为OSCC抗氧化疗法新的治疗靶点。