【摘 要】
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该文主要从亚洲玉米螟幼虫的细胞免疫反应、腰带长体茧蜂寄主对寄主幼虫细胞免疫反应的影响和寄生蜂逃避寄主免疫反应的机制进行了生理、生化和分子生物学研究. 该文主要研究
【出 处】
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中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所 中国科学院上海生命科学研究院
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该文主要从亚洲玉米螟幼虫的细胞免疫反应、腰带长体茧蜂寄主对寄主幼虫细胞免疫反应的影响和寄生蜂逃避寄主免疫反应的机制进行了生理、生化和分子生物学研究. 该文主要研究内容如下: 1.根据光镜和电子显微镜的观察结果将亚洲玉米螟幼虫血细胞分为五类:粒细胞、浆细胞、类绎色细胞、原血细胞和球形血细胞.调查了血细胞总数(THC)和不同类型血细胞数量(DHC)的变化.2. 通过对寄生与未寄生的亚洲玉米螟幼虫血细胞在血细胞总数(THC)、不同类型血细胞数量(DHC)、形态、血细胞的延展性,和对SephadexA-25葡聚糖凝胶珠的包囊以及包囊的黑化几个方面进行了比较,发现寄生后的幼虫与未寄生幼虫的血细胞在以上几个方面都没有明显差异.说明腰带长体茧蜂的寄生对寄主幼虫血细胞的免疫反应并没有产生明显的影响.3.位于腰带长体茧蜂雌蜂卵小管中的未成熟的卵母细胞表面有一层滤泡细胞,而位于侧输卵管中的成熟卵表面则没有.在注入寄主幼虫体内后,卵母细胞和崩溃酶处理后的成熟的卵可以被寄主血细胞包囊而侧输卵管中的成熟的卵则不能被包囊. 4.构建了腰带长体茧蜂胚胎的cDNA文库.首先从寄生到寄主幼虫体内6d的寄生蜂胚胎中提取总RNA和mRNA,使用分离到的微量mRNA合成cDNA第1链.然后通过长距离PCR扩增得到足够量的双链cDNA.5.通过制备胶电泳分离所需的目标蛋白,割下目标蛋白条带直接免疫BALB/c小鼠,制备了97kDa蛋白的多克隆抗体,ELISA检测和点杂交的方法确定抗血清的效价.使用多克隆抗体作为免疫学探针在腰带长体茧蜂cDNA文库中筛选到阳性克隆,然后分别进行转化、质粒提取、酶切鉴定和测序.
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