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目的：在由脂质代谢异常导致的一系列如非酒精性脂肪肝、动脉粥样硬化等疾病中，游离饱和脂肪酸引起的炎症反应是其发生发展的关键环节，为了进一步探究游离饱和脂肪酸引起炎症反应的机制，本实验利用游离饱和脂肪酸（棕榈酸）处理人单核细胞株THP-1，探究炎症反应中重要信号通路Toll样受体（TLR）通路的变化及其调控机制，为寻找该类疾病有效干预靶点提供基础。 方法： (1) NF-κB是TLR信号通路中的核心调控因子，通过瞬时转染核转录因子NF-κB的荧光素酶报告基因至THP-1细胞，检测棕榈酸对NF-κB的活化作用。转染24小时后加入不同浓度的棕榈酸处理不同时间，最后收集各组细胞检测各组荧光素酶基因的表达水平，确定棕榈酸最佳作用浓度与处理时间。 (2)用确定的棕榈酸最佳浓度及作用时间处理THP-1细胞，收集细胞利用反转录PCR、实时定量PCR以及Western Blotting技术分别检测TLR4以及TLR4信号通路中重要传导分子TRAF6的表达水平。 (3)不同浓度棕榈酸处理THP-1细胞后，收集各组上清，利用ELISA技术检测上清中炎性细胞因子TNF-α和TGF-β的表达水平。 (4)利用实时定量PCR技术检测棕榈酸处理后THP-1细胞内miRNAs的表达水平。 (5)将TRAF6基因3’端非编码区域序列导入软件进行microRNA预测，与我们测定表达水平下调的microRNA进行比较，确定miR-194并构建含miR-194种子序列的荧光素酶报告基因。 (6)将构建的报告基因分别与miR-194 mimics、miR-194 inhibitor及各自对照共转染至THP-1细胞，24小时后加棕榈酸处理8h，最后收集各组细胞检测荧光素酶的表达水平，同时利用Western Blotting技术检测各组TRAF6的蛋白表达水平、ELISA技术检测各组上清中细胞因子TNF-α和TGF-β的水平。 结果： (1)荧光素酶报告基因结果显示250μM棕榈酸处理THP-1细胞8h时，NF-κB报告基因的表达水平最高，故而确定棕榈酸的最佳作用浓度和时间。 (2)棕榈酸处理THP-1细胞后，TLR4及TRAF6的表达水平升高。 (3)棕榈酸刺激THP-1细胞后，细胞因子TNF-α和TGF-β的水平升高。 (4)棕榈酸刺激后THP-1细胞内miR-194的表达水平降低。 (5)成功构建含miR-194种子序列的TRAF63’端非编码区的报告基因。 (6)报告基因及Western Blotting结果显示棕榈酸可以上调TRAF6的表达且这种作用可被miR-194抑制，ELISA结果显示miR-194可以减少棕榈酸诱导的细胞因子TNF-α和TGF-β的产生。 结论：棕榈酸可以活化单核细胞THP-1内TLR4信号通路，TLR4通路中的重要信号分子TRAF6表达上调，分泌的炎性细胞因子TNF-α和TGF-β升高，细胞内miR-194下调，TRAF6是miR-194的靶基因，miR-194可以负向调控棕榈酸活化的TLR4信号通路，继而可以用于设计干预游离脂肪酸引起炎症反应的潜在靶点。