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目的 本研究通过大鼠退变性颈椎椎间盘造模后应用二枝汤干预治疗该模型,进行细胞学与基因学实验。用手术方法获取大鼠颈椎椎间盘及髓核组织,采用PCR技术观察二枝汤对退变性颈椎椎间盘内基质金属蛋白酶-11(MMP-11)表达的影响。旨在探讨二枝汤干预下对颈椎椎间盘髓核组织中MMP-11的表达影响的作用机理。方法 首先系统回顾了中医学对颈椎病病因病机的认识和理解,同时对照西方现代医学在颈椎病的病因病机认识和研究进展。将实验设计为先随机分组,再平行对照的方案。经过急性毒性试验无小鼠死亡,未测得二枝汤的半数致死剂量(LD50),取SPF级ICR小鼠40只,体重在18-20g,随机分成A、B两组,每组20只。将二枝汤浓缩为最大浓度,并予两组小鼠连续多次灌胃,A组灌胃3次/日;B组灌胃4次/日。末次灌胃结束后4h可予进食,连续观察动物变化情况7天。7天后称重,颈椎脱臼法处死,解剖并观察小鼠内脏的外观变化。然后进行二枝汤对大鼠颈椎退变椎间盘MMP-11基因表达的影响的实验:选取清洁级180-200gSD大鼠80只,分成A、B、C、D四组;每组各20例。均采取颈椎间盘穿刺法造模,造模成功后分组进行灌胃。A组(对照组):造模后行生理盐水灌胃;B组(实验组):造模后予等剂量二枝汤灌胃;C组(西药组)造模后予等剂量双氯芬酸钠灌胃;D组(中成药组)造模后予等剂量颈痛颗粒灌胃。灌胃30d后取相应穿刺椎间盘组织行MMP-11检测。结果 急性毒性实验中两组小鼠在经过1周的连续灌胃后,均未出现死亡情况。在大鼠实验中,经过检测得出MMP-11基因在二枝汤组中的表达水平低于空白对照组(P<0.05),有统计学意义。二枝汤组、颈痛颗粒组及双氯芬酸钠组的MMP-11的基因表达水平无统计学差异(P>0.05)。结论 二枝汤在最大浓缩浓度下进行急性毒性实验难以测出半数致死量,说明二枝汤的安全性高、毒性很小,为以后进一步进行临床安全性评估打下了良好基础。根据实验结果,二枝汤组能够明显降低MMP-11基因的表达水平,抑制细胞的凋亡,达到恢复椎间盘正常功能的目的。同时二枝汤组对MMP-11基因表达的影响与颈痛颗粒组及双氯芬酸钠组的程度无统计学差异,该实验为更深入研究椎间盘退变的机制提供了实验依据。