论文部分内容阅读
第一部分北方汉族人群冠心病患者CYP2C19基因多态性分析背景：药理学研究发现CYP2C19 (Cytochrome P450 2C19, CYP2C19)基因多态性与氯吡格雷代谢之间有关。CYP2C19基因型突变能预测氯吡格雷抵抗(Clopidogrel resistance, CR)或氯吡格雷低反应(Clopidogrel low response, CLR),并且含有CYP2C19功能缺失型基因者PCI术后急性、亚急性或晚发血栓的风险将显著增大,而一旦出现支架内血栓(stent-thrombosis, ST)事件,无形中将给患者造成巨大灾难。目的：探讨北方汉族人群冠心病(Coronary artery disease, CAD)患者细胞色素P4502C19基因多态性的分布特征及其与氯吡格雷抵抗的相关性。方法：本研究为连续观察性研究,入选自2013年9月至2014年9月在北京武警总医院单中心858例拟行冠脉造影检查及治疗的冠心病患者,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(Polymerase Chain Reaction, PCR; Restriction fragment length polymorphism, RFLP)法检测CYP2C19基因型；并采用光密度比浊法(light transmittance aggregometry, LTA)检测患者腺苷二磷酸(adenosine diphosphate, ADP)诱导的血小板聚集率(platelet aggregation test, PAgT)(入院时和口服负荷量(Loading dose, LD)300mg氯吡格雷24小时后),将LD后血小板聚集率与入院时比较,若绝对值差值≤10%为氯吡格雷抵抗,将患者分为氯吡格雷抵抗组(CR)和非氯吡格雷抵抗组(NCR) (Non-clopidogrel resistance, NCR)[1]。结果：1、入选患者的功能缺失基因*2和*3的突变频率分别为30.5%、4.8%。根据Hardy—— Winberg (Hardy-Weinberge equilibrium, HWE)平衡定律计算出P>0.05,符合Hardy —Winberg平衡,人群有代表性。突变型纯合子慢代谢者的发生率10.4%。快代谢型(野生纯合子)占41.8%,即中间代谢型(单突变)和慢代谢型(双突变)占58.2%,其中单突变频率达到了45.7%,双突变占12.5%。各基因型在性别间无统计学意义。2、入选的858例人群中CR有235例(27.4%),男性139例(59.1%)；非NCR组623例,男性422例(67.7%)。患者临床基线特征中性别、血小板聚集率有显著差异(P值均<0.05),余无统计学差异(P值均>0.05)。3、CR组中含有基因型*1/*1、*1/*2、*1/*3、*2/*2、*2/*3者分别为81例(34.5%)、93例(39.6%)、20例(9.8%)、31例(13.2%)和7例(3.0%)。经比较含有各基因型者组间氯吡格雷反应差异有统计学意义(P值<0.05)。组内分析显示CR组含有基因型*1/*1者较少,差异有统计学意义(P值<0.05)。4、CR组中含有快、中、慢代谢型者分别为81例(34.5%)、116(49.4%)例和38例(16.2%)。经比较各代谢型组间氯吡格雷反应差异有统计学意义(P值<0.05)。组内分析提示：CR组含有中慢代谢、慢代谢基因型者较多,差异有统计学意义(P值均<0.05)。结论：北方汉族人群冠心病患者CYP2C19基因多态性分布特征与全国其它地区一致,携带功能缺失基因*2和*3(中慢代谢型)者较多； CR患者含有功能缺失基因较多。第二部分冠心病PCI术后患者氯吡格雷低反应性与CYP2C19基因多态性的相关性背景：现在许多研究表明在冠心病行PCI术治疗的部分患者中即使长期规律口服标准剂量双联抗血小板药物治疗仍有血栓事件发生,经对患者的血小板进行实验室检查诊断为氯吡格雷低反应(CLR)。研究发现体内CYP2C19基因编码的酶活性在氯吡格雷药物代谢环节中发挥功用,其突变基因和服用氯吡格雷后出现的低反应之间有关。现在CLR的产生原因尚未研究清楚,将其分为实验室和临床诊断,实验室各种血小板功能检测方法均无较高特异性,临床患者出现血栓事件后才诊断呈滞后性。CLR的发生率不是很低,对PCI术后患者的预后影响甚大,引起临床广泛重视,成为研究抗血小板药物治疗领域的热点。目的：探讨冠心病PCI术后患者氯吡格雷低反应性与CYP2C19基因多态性的相关性。方法：入选2013年10月—2014年10月就诊于我院的冠心病行PCI术患者247例,术后给予阿司匹林和氯吡格雷双联抗血小板药,根据血栓弹力图(Thromboelastogram TEG)检测花生四烯酸、ADP诱导的血小板抑制率,判断对阿司匹林和氯吡格雷的反应性。本研究CLR定义为ADP诱导的血小板抑制率<30%,氯吡格雷敏感组≥30%；同样阿司匹林抵抗(Aspirin resistance, AR)定义为AA诱导的血小板抑制率<50%,阿司匹林敏感组≥50%,并采用基因芯片技术检测CYP2C19基因多态性,探讨CLR发生与CYP2C19基因多态性的相关性。结果：1、入选247例患者含有CYP2C19*1/*1与CYP2C19*2/*2.快代谢型与慢代谢型患者间的血小板抑制率比较有统计学差异。2、共91例(36.8%)发生CLR.CLR组与氯吡格雷敏感组比较,敏感组含有快代谢型(基因型*1/*1)患者多于低反应组(P=0.013),CLR含基因型*2/*2患者(P=0.020)和中慢代谢型患者较多。3、共有55例(22.2%)患者出现双重抵抗,36例(25.4%)阿司匹林敏感组患者出现CLR。CLR与阿司匹林抵抗相关。结论：冠心病PCI术后患者CLR与CYP2C19基因多态性、阿司匹林抵抗相关,含有中慢代谢型者易发生CLR。