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目的:阐明P2Y嘌呤(P2Y)受体激动剂ADPβS的葡萄糖依赖性促胰岛素分泌的关键机制,获得P2Y受体介导胰岛p细胞Kv通道的可靠证据,为以P2Y受体为靶点的新型抗糖尿病药物的研究和开发提供理论依据。方法:(1)处死大鼠后,无菌状态下打开腹腔,将配置好的胶原酶P从胆总管打入胰腺后剪下胰腺,38℃水浴震荡消化11min,采用梯度离心法分出大鼠胰岛。用Dispase Ⅱ消化可得到大鼠胰岛p细胞,分得的胰岛和细胞最多使用7天。(2)AO/PI染液孵育胰岛10min,在荧光显微镜下用490nm激发光