烟曲霉GDP-甘露糖焦磷酸化酶的功能研究

来源 :中国科学院微生物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanosn
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GDP-甘露糖焦磷酸化酶(GMPP)催化GTP和甘露糖-1-磷酸反应生成GDP-甘露糖,为糖缀合物的合成提供甘露糖前体。酵母GDP-甘露糖焦磷酸化酶的表达受到抑制导致细胞易自溶、极性生长和细胞分裂障碍。在烟曲霉的基因组中,检索到酵母GDP-甘露糖焦磷酸化酶基因SRB1/PSA1/VIG9的同源片断。将这个片断的cDNA序列Afsrb1置于大肠杆菌表达系统,证明该cDNA编码的蛋白AfSrb1具有GDP-甘露糖焦磷酸化酶的活性。将烟曲霉Afsrb1基因的启动子用A.nidulans alcA启动子取代后,构建了烟曲霉YJ-gmpp条件突变株。3%葡萄糖可以抑制YJ-gmpp的生长,说明Afsrb1是烟曲霉生长所必不可少的关键基因。Afrb1在体内的表达受到抑制后,烟曲霉表现出菌丝自溶倾向、细胞壁缺陷、极性维持缺陷以及分支位点异常等现象;与酵母不同的是,烟曲霉仍然可以一定的极性生长且能产生分隔。另外,与野生株相比,YJ-gmpp的孢子萌发提前,且孢子形成能力降低。研究结果表明,Afsrb1是烟曲霉细胞壁的完整性、细胞形态发生及存活所必需的基因。  
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