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果树矮化栽培可降低生产成本,提高生产效益。果树的矮化途径有多种,但其中最有效的为矮化砧木的应用。柑橘目前还没有一个有效的矮化砧木可在生产中应用,因此,矮化砧木的选育一直是柑橘砧木育种的主要目标之一。枳橙[C.sinensis（L.）Osb×Poncirus trifoliate（L.）Raf.]是甜橙与枳的杂种,是世界各柑橘生产国广泛应用的砧木,继承了枳壳抗脚腐病、抗衰退病的特性,并具有耐旱、耐寒、耐贫瘠,对土壤适用性强、与大多数商用品种亲和力强等特征。但生长势比枳壳强,对接穗品种矮化效果不理想。矮化基因rol是从发根农杆菌中的Ri质粒上的T-DNA上分离出来,转rol基因植物均能明显地改变生长习性,特别是矮化性状突出,把矮化基因导入枳橙,可望选育出矮化优良砧木。本试验在前期获得转基因rol枳橙三个无性系（B、D、E）的基础上,对其高接植株进行了分子鉴定、田间形态学观测、繁殖技术以及砧木矮化试验进行了研究,主要研究结果如下: 1.通过提取转基因及对照高接植株叶片总DNA,对B、D、E三个转化系分别用rolA、B、c和nptⅡ基因的特异性引物进行了PCR检测。试验结果显示,各转化系高接植株叶片总DNA都扩增出特异性条带,与携带rolABC基因的质粒DNA阳性对照扩增出的特异条带一致,而对照植株叶片DNA没有扩增出相应的条带,初步鉴定rolA、B、C及nptⅡ组合基因己成功转入到三个转化枳橙系中。 2.通过提取转基因及对照高接植株同龄叶片、组织培养试管苗叶片及根系总RNA,采用PT-PCR技术分析。结果表明,nptⅡ和rolC能在枳橙基因组中正常表达,但rolA和rolB两基因采用该技术未能检测到其表达信息。 3.对高接转基因植株的田间形态学观测及重要生理指标测定结果表明:①转基因B、D、E系枳橙表现出顶端优势减弱,侧枝增多,植株矮化性状明显,高度是对照植株的44%～50%;②节间长度为对照的39%～40%,叶面积减少为对照植株叶片的30%左右;③光合作用增强;④Rol基因改变了内源赤霉素、生长素、玉米素、脱落酸在枳橙体内的含量及分布,赤霉素、生长素、玉米素等促进类激素在中部、下部叶片含量,均高于对照,Rol基因矮化的机理可能是增加转化植株下部的赤霉素含量,提高体内活性态细胞分裂素水平。 4.建立了转rol基因枳橙组培快繁技术体系。通过对转rol基因枳橙B、D、E系及对照的高接植株春梢茎段进行萌芽诱导、增殖及试管苗生根成苗的试验,摸索出枳橙快速繁殖各技术环节适宜培养基、生长调节剂种类及浓度和培养条件。试验结果表明,以MS附加6-BA 1 mg·L-1的培养基适合于枳橙芽的萌发,