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荔枝皮富含原花青素,具有显著的抗动脉粥样硬化活性,但是原花青素的小肠吸收率极低。研究显示,肠道菌群代谢可能在原花青素生物活性作用过程中发挥着重要的作用。本文采用人肠道菌群体外代谢荔枝皮多酚,UPLC-Q-TOF-MS/MS方法分析荔枝皮多酚(LP)及其肠道菌群代谢产物(LM)组成;采用高通量测序的方法分析代谢过程中肠道菌群的变化;转录组测序方法分析LP及LM对巨噬细胞相关基因表达的影响,探讨LM抑制巨噬细胞泡沫化的作用与机制。主要的研究结果如下:1.LP代谢过程中总酚、抗氧化活性的变化分析了 LP经人肠道菌群代谢不同时间点,其产物总酚含量和抗氧化能力的变化。结果显示,代谢4、8、12、24、48小时,其总酚含量分别降低至0小时的95.03%、92.74%、89.95%、84.21%和79.06%。不同时间点的组间比较结果显示:4～48 h,FRAP和ABTS+.自由基清除能力分别为LP组1.2、0.89、0.95、0.80、0.80倍和1.08、1.14、0.91、0.87、0.89 倍。2.LP及LM的酚类成分分析UPLC-Q-TOF-MS/MS分析的结果显示,LP中主要酚类物质为2,4,6-三羟基苯甲酸、原儿茶酸、原儿茶醛、没食子儿茶素、原花青素B、;表儿茶素-(4β>6)-儿茶素-(2β->7,4β->8)-表儿茶素、A型Propelargonidin三聚体、山奈酚-3-O-葡糖苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、A型原花青素二聚体、A型原花青素三聚体、4-羟基苯乙酮。肠道菌群代谢产物主要为:苯甲酸、苯乙酸、2,4,6-三羟基苯甲酸、香草醛、3-甲基儿茶酚、儿茶素二聚体、3,5,7,3’-四轻基-4’-甲氧基异黄酮、Kaempferide、C15H14O5(还原化代谢物)、(±)8-Gingerol、schizandriside、9-hydroxy-6-gingerol、雷酚内酯(Triptophenolide)等。其中,在菌群代谢物中新检出的化合物主要有3,5,7,3’-四羟基-4’-甲氧基异黄酮、Kaempferide、C15H14O5(还原化代谢物)、(±)8-Gingerol、schizandriside、9-hydroxy-6-gingerol、雷酚内醋。3.LP代谢过程中优势菌属及其变化高通量测序的结果显示,代谢过程中相对含量较高的10种优势菌属依次为拟杆菌属(Bacteroides),梭菌属(Clostridium),肠球菌属(Enterococcus),链球菌属(Streptococcus),考拉杆菌属(Phascolarctobacterium),消化链球菌属(Peptostreptococcus),颤螺球菌属(Oscillospira),假单胞菌属(Pseudomonas),柠檬酸细菌属(Citrobacter),脱硫弧菌属(Desulfovibrio)。其中梭菌属、拟杆菌属、消化链球菌属和柠檬酸细菌属在0～48小时代谢过程中呈下降趋势,代谢48 h时,其分别下降至Oh的50.87%、57.16%、28.15%和7.37%,其他6种菌属在0～48小时代谢过程呈上升趋势,48 h时,其分别增加至Oh的1.47、1.09、1.85、1.63、1.74、10.95倍。其中,代谢过程中差异较大的8个属为拟杆菌属、脱硫弧菌属、嗜胆菌属(Bilophila)、梭杆菌属(Fusobacterium)、苍白杆菌属(Ochrobactrum)、沙门氏菌属(Eggerthella)、颤螺球菌属和萨特菌属(Sutterella)。4.LP及LM抑制巨噬细胞泡沫化的作用LP和LM可以显著降低巨噬细胞内的脂质含量,其中15μg/mLLP和LM干预ox-LDL诱导的巨噬细胞后,细胞内的胆固醇酯、总胆固醇以及胆固醇酯/总胆固醇的比值分别降低至模型组的69.78%、64.87%,85.71%、81.75%和81.22、79.40%;25μg/mL的分别降低至模型组的 50.08%、43.73%,73.33%、68.13%和 68.31%、64.21%。此外,15 μg/mL的LP和LM干预后,细胞内ROS、MDA含量分别降低至模型组的86.72%、76.97%和74.99%、75.24%;25μg/mL的分别降低至模型组MDA含量的64.56%和62.50%。15μg/mL的LP和LM可以显著降低巨噬细胞TNF-α IL-6的含量,其分别降低至模型组的68.65%、68.31%和88.73%、89.02%,25 μg/mL的分别降低至模型组的 58.75%、58.23%和 84.31%、84.80%。5.LP及LM抑制巨噬细胞泡沫化的作用机制分析转录组测序的结果显示,LP主要通过调节Cytokine-cytokine receptor interaction、TNF和NF-κB信号通路,显著上调细胞Tnfaip3和nceh1基因表达,下调细胞Cxc111、Pdgfa和Cxc110基因表达抑制炎症因子、胆固醇酯的生成,促进炎症反应的负向调节,进而抑制巨噬细胞的泡沫化;LM主要通过调节Toll-like receptor信号通路介导胆固醇的外流,显著地上调细胞Notch3、Tnfaip3和Egr2基因表达,下调S1pr1、Chst1和Adgre5基因表达,抑制炎症因子的表达,促进胆固醇外流,进而抑制巨噬细胞泡沫化。转录组测序分析的结果表明,LP和LM抑制巨噬细胞泡沫化的主要机制存在差异。