论文部分内容阅读
目的:通过氩离子激光诱导建立兔视网膜色素上皮局部变性模型,并观察光凝前、后视网膜形态及功能特征。采用新鲜分离的视网膜色素上皮(RPE)细胞移植入模型兔眼的视网膜下腔,以闪光视网膜电图(F-ERG)作为视功能的客观评价指标,分析移植后的视功能改变情况,同时进行移植RPE细胞组织形态学观察,探讨RPE移植对变性视网膜的损伤修复效果,为进一步的临床应用研究提供前期实验基础。方法:(1)选用健康青紫蓝兔10只,其中7只,对其左眼施行氩离子眼底激光光凝,分别检测激光前及激光后不同时间点的F-ERG,分析视功能改变情况。另取3只兔按同样方法建模,于激光后7天摘除眼球做病理切片,HE染色后光镜观察其组织学改变。结合功能及形态研究,选择移植合适时机。(2)选用健康青紫蓝兔15只,其中5只作为RPE细胞的供体。另外10只按方法(1)制备RPE局部变性模型,随机分为两组,对照组左眼激光后不做处理,移植组在激光后7天,采用新鲜分离的RPE细胞通过内路法手术移植入激光眼的视网膜下腔。分别检测移植前及移植后不同时间点的F-ERG,并与对照组进行比较,分析视功能修复状况。移植后3周摘取眼球行光镜观察。结果:(1)激光后1天F-ERG中视杆细胞反应b波波幅降至最低,3天后有小幅回升并趋于平稳,但仍低于激光前水平,峰潜时均无显著变化;激光后4小时最大混合反应a、b波波幅降至最低,1天后略有回升,7天后呈平稳状态低于激光前水平,峰潜时均无显著变化;激光后1天振荡电位OPs的∑O值降至最低,3天后逐步回升,但仍低于激光前水平。激光后7天组织切片见RPE细胞变性破坏,深层脉络膜及节细胞层未受明显影响。(2)移植后1周视杆细胞反应b波及最大混合反应a、b波波幅均显著升高,此后虽稍有回落,但仍高于对照组,移植后两组组间各对应时间点波幅值差异具有显著性,组间及组内的峰潜时比较差异无统计学意义;移植后1周振荡电位OPs的∑O值回升且接近激光前正常水平,与对照组相比,1～2周内差异显著,3周后差异无统计学意义。移植后3周组织切片见移植RPE细胞单层排列于Bruch膜上,未发生炎症及免疫反应。结论:激光光凝可以破坏RPE细胞及邻近光感受器细胞,建立RPE局部变性模型。激光后7天是移植的合适时机,有助于移植效果的观察比较。RPE移植有助于视功能的改善,恢复视网膜血供及营养,对变性视网膜的损伤修复具有一定的积极作用。