论文部分内容阅读
土霉素(oxytetracycline,OTC)属于四环素类的抗生素,由于它可以促进动物的生长,所以在动物养殖的过程当中经常用于防病治病和作为生长剂添加使用,但是土霉素的不合理使用会导致动物性食品中土霉素的残留,人们长期摄入含有土霉素残留物的食品会对人体的健康产生一定的危害。目前,对于食品中土霉素残留量的分析检测方法已有大量的报道,但传统方法检测方法(主要是色谱法)中使用的仪器相对昂贵,操作复杂,在现场检测中不适用。因此,迫切需要探索一种简单,稳定,快速,高灵敏度的土霉素检测方法。基于适配体易合成、易修饰的优点和电化学方法灵敏度高、选择性好、应用范围广的优势,本实验构建了可用于快速高效检测土霉素的适配体电化学传感器,该方法可以实现对土霉素稳定,快速,高灵敏度的测定,并且可以实现对牛奶样品中土霉素的快速检测,具体步骤如下:首先对电极进行预处理,在预处理的电极表面修饰4-羧基苯基重氮盐后,使用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基丁二酰亚胺(NHS)作为活化剂,对羧基进行活化,通过适配体上的氨基与羧基形成酰胺键将可以特异性识别土霉素的适配体固定在电极表面,完成适配体电化学传感器传感界面的构建过程。实验过程中通过循环伏安(CV)、交流阻抗法(EIS)、扫描电镜(SEM)对适配体电化学传感器的构建过程进行表征。对影响适配体电化学传感器性能的条件进行了优化,包括适配体浓度,适配体的结合时间,孵育时间。实验结果表明适配体最优浓度为2μmol/L,适配体最佳结合时间为12 h,适配体与土霉素最佳孵育时间为1 h。对所构建的土霉素适配体电化学传感器进行性能测试,包括土霉素检测标准曲线的建立,传感器选择性、重复性、重现性、稳定性。实验结果表明所构建适配体电化学传感器的差分脉冲伏安法(DPV)电流响应与土霉素浓度的对数在1×10-99 g/mL1×10-44 g/mL范围内呈线性关系,其相关系数为0.9897。并且该传感器可以很好的对土霉素进行特异性识别,对盐酸强力霉素、盐酸金霉素几乎没有识别作用,对1×10-55 g/mL、1×10-66 g/mL的土霉素进行三次重复实验,它们峰电流响应的相对标准偏差(RSD)分别为3.75%、2.16%,使用构建好的传感器对1×10-99 g/mL1×10-4g/mL的土霉素分别测定三次,用DPV法记录其峰电流响应值,不同浓度土霉素峰电流响应值批次间的RSD值不超过5%。同时,所构建的适配体电化学传感器具有很好的稳定性,将三只平行制备的电极放于4℃下,每隔5天采用DPV对10 ng/mL的土霉素进行检测,连续测三次,第三次测得的峰电流响应值约原始测量值的81%,采用加标回收的方法将对牛奶样品中土霉素进行检测,取得了良好的效果,加标回收率为87.0%-97.7%。