延边地产传统朝药材万年蒿的质量标准研究

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目的:对延边地产传统朝药材万年蒿质量进行质量评价参数测定,研究其显微结构特征,建立万年蒿药材TIC与HPLC指纹图谱及HPLC定量方法,弥补《吉林省药品质量标准》(1977年版)中万年蒿质量标准项下的空白,为全面提升万年蒿质量标准提供科学依据。  方法:1按照2010年版《中国药典》附录ⅨH、ⅨK、XA、ⅧH和ⅧJ进行水分,灰分,浸出物,重金属与砷盐的测定;2采用石蜡切片法对万年蒿茎、叶的显微特征进行观察;采用水合氯醛透化法进行万年蒿粉末的显微特征观察;3建立TLC与HPLC指纹图谱,万年蒿的质量控制及品种鉴定提供依据色谱条件:Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5?m)甲醇-0.4%磷酸水溶液线性梯度洗脱,流速1.0 ml·min-1,柱温35℃,检测波长为360 nm。4.采用改良寇氏法和最大给药量法(MTD)进行安全性评价。  结果:1.质量评价参数:建议万年蒿药材水分不得超过8.00%为宜,总灰分不高于7.0%为宜,酸不溶性灰分不高于1.0%为宜,热浸法水溶性浸出物含量不低于19.19%为宜,热浸法稀乙醇浸出物不低于20.00%为宜,重金属(Pb2+)不高于10ppm为宜,砷盐不高于2ppm为宜。2延边地产万年蒿茎、叶及粉末的显微特征:茎横切面韧皮部有大量纤维束,髓部宽广;叶横切面见1列栅栏组织。全株粉末可见木栓细胞,多细胞非腺毛,具缘纹孔导管,螺纹导管;初步建立延边地产万年蒿药材的TLC指纹图谱,8个共有斑点呈较好的重现性;TLC定性鉴别中,在F254 nm下,东莨菪内酯、槲皮素、木犀草素Rf值分别为0.75、0.25、0.19。3.根据延边不同产地的9批检测结果,选择各保留时间和峰面积稳定的16个共有峰标定万年蒿化学成分的指纹图谱,具有良好的系统性、特征性和重复性。经过相似度评价,所选择的延边8大县市万年蒿指纹图谱相似度大于0.90,具有良好的相关性。4.HPLC含量比较结果:延边不同产地万年蒿药材中东莨菪内酯、槲皮素、木犀草素含量存在一些差异。5.小鼠经口急性毒性试验结果表明:细粉的最大给药量为生药15g/kg,相当于万年蒿成人(体重以60kg计)日用剂量的102~153倍;水煎剂的LD50为104.40g/kg,95﹪可信限为95.46~114.18g/kg。万年蒿在常用剂量范围内是安全的。结论:万年蒿的显微特征及TLC法专属鉴别方法;万年蒿药材TLC和RP-HPLC指纹图谱及万年蒿中东莨菪内酯、木犀草素、槲皮素3组分含量同测技术;万年蒿细粉与水煎剂安全性评价均填补了《吉林省药品标准》(1977年版)中万年蒿质量标准的空白,本研究为传统朝药材万年蒿的质量标准的全面提升与系统规范化研究,提供了可靠的科学材料支撑。
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