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目的：⑴检测衰老过程中大脑小胶质细胞数目和形态的改变；⑵检测衰老过程中大脑小胶质细胞分泌IL-6、IL-1β水平的改变；⑶检测衰老过程中大脑小胶质细胞吞噬Aβ42能力的改变。
方法：①以McCarthy的方法为基础，并加以改进，采用振摇结合贴壁分离法纯化小胶质细胞；CD11b免疫细胞化学染色对纯化的小胶质细胞纯度进行鉴定；相差显微镜下进行细胞形态观察和细胞计数；CCK-8比色法检测纯化的小胶质细胞在不同时间点的活力和增殖。②将小胶质细胞以1×105/well种入24孔板，各年龄组小胶质细胞均设对照组和3个实验组，对照组为正常衰老组，不加任何干预；实验组1加入25ng/mlLPS刺激，实验组2和实验组3分别加入250nM和500nM浓度的Aβ42，孵育24h。24h后取上清液用ELASA法测定IL-1β和IL-6水平。③用FAM标记聚集态的Aβ42，并孵育小胶质细胞；24h后，吸去介质液，并用加有胎盘蓝的PBS平衡盐溶液清洗小胶质细胞，以消除残留在细胞外和细胞膜上的荧光蛋白；用多功能酶标仪分析测定细胞内的荧光强度。
结果：⑴纯化分离的不同年龄组小胶质细胞进行CD11b抗体染色阳性细胞≥95％，培养过程中未出现明显的增殖。⑵Aβ42呈剂量依赖性诱导小胶质细胞分泌IL-1β和IL-6增加，差异有显著性意义（P＜0.05）；250nM Aβ42与LPS组IL-6水平无统计学差异（P＞0.05）；随大鼠年龄的增大，小胶质细胞分泌IL-1β和IL-6水平呈梯度增高，差异有统计学意义（P＜0.05）。⑶结果显示，衰老过程中小胶质细胞荧光强度呈梯度降低，对三个年龄组小胶质细胞内的荧光强度进行方差分析和两两比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。
结论：①以McCarthy的方法为基础，并进行适当的改良，成功培养出不同年龄组SD大鼠源性的小胶质细胞，为下一步研究打下了基础；衰老过程中，SD大鼠大脑皮层内的小胶质细胞数量无明显改变；老年组SD大鼠源性的小胶质细胞的活力明显低于青年组和中年组。②Aβ42呈剂量依赖性诱导小胶质细胞分泌IL-1β和IL-6增加，小剂量Aβ42诱导小胶质细胞分泌IL-6的作用类似于LPS；随着机体的衰老，小胶质细胞更易于呈现一种活化状态，其分泌IL-1β和IL-6的水平在不同刺激条件下均随年龄增长而呈梯度增高。③在衰老过程中，小胶质细胞吞噬清除Aβ42的能力逐渐下降。