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体外胚胎生产中,各种抗氧化剂常被添加于不同的培养液中以提高体外胚胎生产效率。实验表明,表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin Gallate, EGCG)能够清除健康细胞中ROS,提高配子的抗氧化能力,有利于动物卵母细胞体外成熟和精子受精。本研究主要探讨了EGCG对水牛卵子体外成熟、精子受精能力的影响以及可能的作用机理,旨在使水牛体外胚胎生产高效化。本研究包括三个试验：试验一,EGCG对水牛卵母细胞体外成熟的影响。旨在探讨EGCG对水牛卵母细胞卵丘扩展、成熟率的影响,并初步试验EGCG对水牛配子发育潜能的影响。结果发现：(1)10、20 μmol/L处理组与对照组卵丘扩展指数差异显著(2.49、2.42 vs.2.22, P<0.05);5、30 μmol/L处理组卵丘扩展指数也高于对照组,但无统计学意义(2.36、2.28 vs.2.22,P>0.05)；(2)10、20μmol/L处理组成熟率显著高于对照组(59.31%、50.98% vs.45.26%,P<0.05)；但两组之间差异不显著；5 μmol/L和30 μmol/L处理组的成熟率与对照组差异不显著(47.04%、42.81% vs.45.26%,P>0.05)；(3)在成熟液中添加EGCG,各处理组的卵裂率、囊胚率均高于对照组,其中10 μmol/L处理组效果最佳。孤雌激活后,卵裂率和囊胚率均显著高于对照组(67.07%vs.57.53%、31.69% vs.20.66%, p<0.05);体外受精后,卵裂率和囊胚率也显著高于对照组(59.64% vs.44.65%、24.68% vs.15.02%, p<0.05)。以上结果表明,EGCG能促进水牛卵母细胞体外成熟,并提高了卵母细胞的发育潜能。试验二,EGCG (0、5、10.20、30 μmol/L)对水牛卵母细胞体外成熟阶段抗氧化能力的影响。结果显示：(1)添加20.30 μmol/L的处理组MⅡ期ROS DCF荧光强度与对照组差异显著(18.77、25.39 vs.38.04,P<0.05)；(2)各处理组MⅡ期水牛卵母细胞H202含量与对照组差异不显著(4.68、4.33、4.16、4.51 vs. 4.90, P>0.05); (3) 5、10、20 μmol/L处理组GSH含量与对照组差异显著(3.0、3.21、3.25 vs.2.59, P<0.05); 30 μmol/L处理组GSH含量也高于对照组,但无统计学意义(2.99 vs.2.59,P>0.05)。以上结果表明：在水牛卵母细胞体外成熟过程中,EGCG能够降低卵母细胞内活性氧水平,提高GSH的合成,但不能降低H202的含量；(4)综上所述,在卵母细胞体外成熟过程中,EGCG影响氧化反应。试验三,探讨在受精液中添加10 μmol/L的EGCG对水牛精子受精能力的影响以及在成熟液和受精液中同时添加EGCG是否有协同作用。结果显示：在成熟液、受精液、成熟液和受精液中分别添加10μmol/L的EGCG后,各组卵裂率显著高于对照组(61.31%、59.14%、58.57% vs.45.71%,P<0.05)；各组的囊胚率显著高于对照组(23.61%%、22.77%、23.56% vs.16.74%,P<0.05)。以上结果表明,EGCG能提高水牛精子受精能力和促进早期胚胎发育,但在成熟液和受精液中同时添加EGCG没有协同作用。为了高效方便,本试验中,最佳方案为在成熟液或者受精液中添加10 μmol/L的EGCG。总之,EGCG作为一种高效的抗氧化剂,能够促进水牛卵母细胞体外成熟、体外受精,并提高了胚胎体外发育率。EGCG对提高水牛体外胚胎生产有积极影响,可提高水牛卵子的利用率。本实验室条件中,单独在成熟液或者受精液中添加10 μmol/L EGCG效果最好。