【摘 要】
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本实验分别采用了逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和镉/血红蛋白饱和一电化学分析法检测了MT基因组和MT在6株人胰腺癌细胞株和2株人胰腺癌耐药细胞株中的表达情况;并采用外源性锌
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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本实验分别采用了逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和镉/血红蛋白饱和一电化学分析法检测了MT基因组和MT在6株人胰腺癌细胞株和2株人胰腺癌耐药细胞株中的表达情况;并采用外源性锌离子上调MT的表达,反义寡聚核酸技术抑制MT的表达,观察MT基因组和蛋白的改变对人胰腺癌细胞株耐药性的影响.我们发现:①在6株人胰腺癌细胞株中,MT在蛋白水平存在着不同水平的表达.在基因水平,6株人胰腺癌细胞株中的MT可以由MT-1A,MT-1B,MT-1E,MT-1F,MT-1G,MT-1X及MT-2A基因编码,在不同人胰腺癌细胞株中各基因表达的量各有不同.而MT-1H基因不在人胰腺癌细胞株中表达.②MT在人胰腺癌耐药细胞株SW1990/ADM和SW1990/Fu中的表达水平显著高于其亲本株.在基因水平,MT-1X基因在人胰腺癌耐药细胞株SW1990/ADM中的表达水平显著高于其亲本株,MT-1B,MT-1E及MT-2A基因在人胰腺癌耐药细胞株SW1990/Fu中的表达水平显著高于其亲本株,差异均有统计学意义(P<0.05).③外源性锌离子能诱导上调MT-1B,MT-1E,MT-1G,MT-1X及MT-2A基因和MT在人胰腺癌细胞株SW1990中的表达,可以提高人胰腺癌细胞株SW1990对化疗药物5-氟尿嘧啶和阿霉素的耐药性.④通过反义寡聚核酸技术能抑制MT-1E,MT-1F,MT-1X,MT-2A基因以及MT在人胰腺癌细胞株SW1990中的表达,可以使人胰腺癌细胞株SW1990对化疗药物5-氟尿嘧啶和阿霉素的耐药性下降.证实了MT在人胰腺癌细胞株中的表达与胰腺癌化疗耐药性呈正相关.另外,本实验还通过对RT-PCR产物测序发现了一个MT-2A突变基因,其编码蛋白的氨基酸序列也发生了突变.
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