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在畜牧生产中,铬常用作饲料添加剂,以改善畜禽胴体品质、提高饲料利用率及增强抗应激能力等,但其应用不恰当,也会造成动物机体的慢性中毒。许多研究表明,肝脏是铬的主要靶器官之一,且过量的铬可以诱导多种动物模型发生细胞自噬及内质网应激。花青素是天然的黄酮类化合物,具有抗氧化、清除自由基、抗癌和抗肿瘤等作用。因此,为充分了解铬(Ⅵ)对LMH细胞的毒性作用及紫番茄花青素(PTA)对铬(Ⅵ)诱导LMH细胞自噬及内质网应激的调节作用,本试验从内质网应激及自噬两个方面对PTA的保护作用进行研究。试验中通过建立LMH细胞中毒模型,将紫番茄花青素与铬(Ⅵ)单独处理或共孵育处理20h。通过细胞形态观察及检测细胞存活率来验证铬(Ⅵ)诱导LMH细胞损伤水平、自噬水平及花青素对其保护作用;通过添加内质网应激诱导剂(Tg)及抑制剂(4-PBA)来验证本试验中内质网应激与自噬的关联;通过Western Blot、ELISA检测内质网应激(GRP78/Bip及PERK)、自噬相关蛋白(LC3、P62、Beclin1和mTOR)及COX-2蛋白水平变化,进而验证铬(Ⅵ)及花青素对LMH细胞内质网应激及自噬水平的影响。试验结果表明,铬(Ⅵ)诱导细胞脱落并降低细胞大小及密度,降低细胞存活率,而PTA能减轻铬(Ⅵ)对细胞产生的损伤。当3-MA抑制自噬时,能够显著改善铬(Ⅵ)引起的细胞存活率降低现象,且PTA发挥着与3-MA相似的功效。当添加内质网应激诱导剂(Tg)或抑制剂(4-PBA)时,能够相应的加重或减轻铬所引起的细胞活性降低现象。铬(Ⅵ)可显著诱导自噬标志性蛋白(Beclin1和LC3 II/I),内质网应激标志性蛋白(GRP78和PERK)和COX-2蛋白水平升高,抑制通路蛋白mTOR和自噬相关蛋白P62的表达,而PTA可以缓解铬(Ⅵ)诱导的上述蛋白表达量的变化。总之,试验表明Cr(Ⅵ)诱导LMH细胞发生过度自噬,而紫番茄花青素(PTA)可改善Cr(Ⅵ)诱导的自噬和内质网应激,这为Cr(Ⅵ)诱导的重金属中毒保护剂的筛选提供了理论基础。