目的:随着胸腹水细胞学诊断的广泛应用,如何减少漏诊、误诊,提高诊断阳性率具有重要的实际意义,正确保存、及时送检及合理固定是保证细胞学诊断正确性的重要前提。但临床实践中由于种种原因,经常出现标本保存不良、送检不及时等问题,为探讨保存时间和保存温度对细胞学诊断的影响,本研究对未固定离体胸腹水在不同保存温度和时间下制作的常规细胞学涂片和细胞团石蜡切片进行观察,对单核细胞、间皮细胞和肿瘤细胞的形态学特征、高倍视野下平均细胞数、细胞退变情况进行综合分析,为胸腹水细胞的保存温度和细胞涂片及细胞蜡块的最佳制作时机提供理论依据。方法:收集河北医科大学第二医院病理科2015-2016年间送检的胸水和腹水标本30例,所有胸腹水全部即时送检,每例新鲜标本充分混匀后分成18份,每份10ml,置密闭离心管中,2份标本立即离心,分别制作细胞涂片和细胞蜡块,记为对照组。剩余16份标本分为两组,8份为冷藏环境组(4℃)、8份为室温环境组(24℃)。两实验组分别在6h、24h、48h、72h四个时间段取样,3000 rpm离心10min,各涂片2张,沉渣细胞制备细胞蜡块,常规切片、HE染色。结果:1细胞形态学观察可见对照组细胞涂片及细胞团石蜡切片细胞形态结构正常,可以分辨细胞类型。随着保存时间延长,细胞出现一系列退行性改变,或表现为细胞体积增大,细胞核染色逐渐变浅,染色质及核膜结构变模糊,难以辨别细胞形态;或表现为细胞体积缩小,细胞核固缩,细胞质变红。细胞团石蜡切片HE染色切片中组织结构也随保存时间的延长而消失,成为无法辨认的退变细胞团。在相同保存时间,冷藏环境组细胞形态变化较室温环境组略好。2细胞涂片每高倍视野平均细胞数观察结果表明,在0-72小时的范围内,随着保存时间的延长,未固定胸腹水细胞涂片中平均细胞数逐渐减少(室温环境r=-0.321,P<0.05;冷藏环境r=-0.357,P<0.05)。室温及冷藏48h、72h组的平均细胞数均低于对照组(P<0.05),而室温及冷藏6h、24h组的平均细胞数与对照组相比无明显差异。在相同保存时间,冷藏环境组与室温环境组相比,无显著差异。3在0-72小时的范围内,随保存时间延长,在室温环境及冷藏环境下未固定胸腹水细胞的涂片中细胞退变率均逐渐升高(室温环境r=0.850,P<0.05;冷藏环境r=0.654,P<0.05)。室温及冷藏6h、24h、48h、72h组的细胞退变率均高于对照组(P<0.05)。冷藏环境组与室温环境组在6h的细胞退变率相比,冷藏6h组低于室温6h组(P<0.05)。冷藏环境组与室温环境组在24h、48h、72h的细胞退变率相比无明显差异。4 30例未固定胸腹水样本在实验期内有4例标本出现细菌污染而不能观察,占样本总数的13.33%。在室温环境下24h检出2例、48h1例、72h1例;而在冷藏24h检出1例、48h 1例、72h 2例。可见冷藏环境下污染出现较晚。结论:1在0-72小时的范围内,随着保存时间的延长,室温环境及冷藏环境下未固定胸腹水细胞涂片中每高倍视野平均细胞数逐渐减少,细胞退变率明显升高。2未固定胸腹水在冷藏环境与室温环境保存6小时对细胞数目无明显影响,可满足正常诊断需要。但在6小时内,冷藏环境可减少细胞退变率,因此建议未固定胸腹水离体后冷藏保存。