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1.ADP355多肽作为脂联素的替代物通过抑制肝星状细胞与巨噬细胞,保护肝脏免于急性损伤与纤维化。背景:脂联素是脂肪细胞分泌的因子,有益于肝组织。在脂联素缺陷小鼠中四氯化碳诱导的肝纤维化加剧,说明脂联素对肝损伤具有保护作用。目标:探索ADP355(脂联素的活性短肽)在硫代乙酰胺(TAA)诱导的急性损伤与慢性肝纤维化中的保护作用和分子机制。主要研究方法:小鼠肝损伤模型由溶解于磷酸缓冲液的4%TAA经腹腔注射诱导。腹腔注射ADP355及其scramble对照。通过三个独立的体内试验分别探讨ADP355在慢性损伤中的抗纤维化作用,在脂联素缺陷小鼠中的补偿替代脂联素作用,及其在急性损伤中的保护作用。体外细胞试验分别使用了脾细胞(脾脏组织中分离)、LX-2细胞(人类肝星状细胞系)与RAW264.7(小鼠巨噬细胞系)。结果:ADP355可抑制肝星状细胞激活,降低肝纤维形成;抑制巨噬细胞激活,减轻了肝脏坏死性炎症。ADP355促进肝再生,抑制肝凋亡,使小鼠从TAA诱导的衰竭中恢复。ADP355 一定程度上补偿了脂联素缺陷小鼠中脂联素的作用。体外试验分析表明,ADP355处理可抑制辅助T细胞的增殖;消弱LX-2细胞中SMAD2的信号及核易位,促进LX-2细胞凋亡。此外,ADP355处理还可诱导巨噬细胞RAW264.7中STAT3信号的激活。结论:脂联素活性肽ADP355可以作为脂联素替代物,发挥脂联素受体激动剂作用,促进肝损伤修复,表现出良好的药用价值。2.Embelin作为核因子-κBp65(NF-κB)的抑制剂,降低TAA诱导的急慢性肝损伤。背景:NF-κB途径在肝病等多种急慢性炎症疾病中发挥重要作用。因此,NF-κB已经作为调控炎症的靶点用于发现与筛选新药物。报道显示,embelin可抑制肿瘤细胞中NF-κB p65活性。目标:探讨embelin作为NF-κB抑制剂,促进肝星状细胞凋亡及对急慢性肝损伤的保护作用。主要研究方法:肝星状细胞系LX-2细胞培养在DMEM培养基中,分别用不同浓度的TAA诱导损伤,并用不同浓度的embelin处理。TAA诱导的急慢性损伤动物模型参照研究内容1(见上)。体内模型,I,Embelin剂量均为50μg/g体重,灌胃口服。应用磷酸化的p65来检测体内外的NF-κB活性。结果:体外试验表明,Embelin(50pM)削弱了肝星状细胞中TAA诱导的NF-κBp65活性。体内试验结果显示,embelin处理抑制了肝损伤小鼠肝脏中的NF-κBp65活性,改善了慢性损伤引起的肝纤维化,显著降低了急性损伤小鼠的死亡率。结论:Embelin作为NF-κBp65的抑制剂,对急慢性肝损伤小鼠具有很好的治疗效果。