目的：本研究旨在（1）探索NEDD修饰在小鼠T淋巴细胞发育和抗感染免疫过程中的作用，（2）为抗感染免疫和T淋巴细胞白血病（T cell acute lymphoid leukemia，T-ALL）的治疗提供理论与实验依据。　　内容：1：NEDD修饰对小鼠T淋巴细胞发育的影响。2：NEDD修饰对小鼠T淋巴细胞介导的抗李斯特菌感染免疫的影响。3：NEDD修饰在T-ALL体内外恶性生长过程中的作用以及MLN-4924的抗T-ALL作用。　　方法：为探索NEDD修饰在小鼠T淋巴细胞发育和抗感染免疫应答过程中的功能，使用的方法如下。　　1：以Lck-Cre小鼠和Uba3基因打靶小鼠为亲本，建立Uba3△T小鼠模型。该模型小鼠Uba3只在T细胞中敲除，从而只阻断T细胞内的NEDD修饰。　　2：取1周龄、2周龄和6周龄小鼠胸腺及脾脏T细胞，对其表面抗原分子进行标记和流式检测，以研究Uba3条件性敲除及NEDD修饰功能丧失对T细胞发育的影响。　　3：李斯特菌感染6-8周龄小鼠，感染结束后标记抗原特异性脾脏CD8＋CD4－T细胞并进行流式检测，以研究Uba3条件性敲除及NEDD修饰功能丧失对小鼠抗胞内寄生菌免疫的影响。　　为研究NEDD修饰在T-ALL体内外恶性生长中的作用，以及MLN-4924的抗T-ALL作用，使用的方法如下。　　1：以0.5μM MLN-4924处理T-ALL细胞株Molt3，Molt4，Jurkat，CEM和HSB2（以等体积DMSO处理的T-ALL细胞为对照），检测上述T-ALL细胞在细胞周期、细胞凋亡、克隆形成等方面的变化情况，以研究NEDD修饰对T-ALL体外存活及恶性生长的影响。　　2：建立CEM移植瘤NOD-SCID小鼠模型，给予小鼠60mg/kg剂量的MLN-4924进行治疗（对照小鼠给予等体积DMSO），记录移植瘤体积、数量和重量的变化，以研究NEDD修饰对T-ALL体内恶性生长的影响。同时观察MLN-4924是否具有抗T-ALL的作用。　　3：通过对转录组芯片检测结果的聚类分析和免疫荧光技术，尝试寻找MLN-4924抑制T-ALL细胞恶性生长的可能机制。　　4：慢病毒感染T-ALL细胞敲低RBX1和14-3-3ξδ（对照T-ALL细胞感染NC慢病毒），通过检测这些T-ALL细胞的凋亡和/或周期，对可能的机制进行验证。　　结果：通过研究NEDD修饰在小鼠T淋巴细胞发育和抗感染免疫应答中的作用，得到如下结果。　　1：成功建立Uba3△T小鼠模型。　　2：NEDD修饰是小鼠T淋巴细胞发育过程中不可缺少的蛋白质翻译后修饰（post translational modifiction，PTM）机制。NEDD修饰被阻断后，小鼠CD4 T细胞发育、成熟都受到迟滞；CD8 T细胞的发育受到阻滞；CD4 T细胞与CD8 T细胞之间的趋异分化平衡遭到破坏。同时，以上对T细胞发育的影响持续到成年后仍不能消除。　　3：NEDD修饰是小鼠T淋巴细胞介导的抗胞内寄生菌免疫所必需的PTM。NEDD修饰活性下降或功能丧失后，李斯特菌感染的小鼠胸腺严重萎缩、脾脏剧烈肿大，不能清除病原菌。　　通过研究NEDD修饰在T-ALL体内体外恶性生长中的作用，以及MLN-4924的抗T-ALL作用，得到如下结果。　　1：NEDD修饰是T-ALL维持体外存活及恶性生长必需的PTM：MLN-4924抑制T-ALL细胞NEDD修饰后，T-ALL细胞周期被阻滞于G2/M期，凋亡比例升高，克隆形成能力丧失。同时，NEDD修饰是T-ALL维持体内恶性生长所必须的PTM：MLN-4924治疗后，CEM移植瘤体积减小，数量减少，重量减轻，而对照小鼠的CEM移植瘤体积增大，数量增多，重量增加。　　2：MLN-4924具有潜在的抗T-ALL效果。这种效果可能由三种机制共同作用所致：阻断Cullins蛋白的NEDD修饰后引起的细胞周期阻滞，进而引起细胞凋亡；核糖体蛋白表达发生紊乱进而引起核仁胁迫（nucleolar stress），使核仁结构崩解，从而不能继续完成细胞周期；细胞内重要的支架蛋白分子14-3-3ξδ表达水平降低，进而不能行使其抗凋亡的功能。　　结论：NEDD修饰是T细胞发育过程中一种重要的PTM。NEDD修饰活性的正常发挥对T细胞顺利渡过并完成发育各阶段，平衡趋异分化都至关重要。同时，NEDD修饰还是抗感染免疫所不可缺少的PTM。最后，NEDD修饰是T-ALL 维持恶性生长所必须的PTM机制。因此，NEDD修饰的抑制剂MLN-4924有望成为治疗T-ALL的化疗药物。