特异性产漆酶木豆内生真菌的筛选、鉴定及其发酵工艺研究

来源 :北京化工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangyujie309
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
漆酶作为一种多酚氧化酶,因其作用底物的广泛性已被应用在食品工业、造纸工业和染料脱色等领域。本研究从分离获得的185株木豆内生真菌中筛选得到三株特异性产漆酶的内生真菌,并鉴定了其形态学和分子生物学特征。同时以漆酶酶活为指标,优化了其发酵培养基及其发酵培养条件,并初步探讨了木豆内生真菌源的漆酶性质及其在刚果红和结晶紫两种染料脱色方面的应用,拓宽了漆酶在工业中的应用。  本研究主要内容包括:⑴利用漆酶能够氧化愈创木酚为红褐色的显色反应,在鉴别培养基筛选到产漆酶的三株木豆内生真菌分别为 R-26,R-37和 R-45。利用形态学和分子生物学鉴定三株菌株均属于疣孢漆斑菌Myrothecium verrucaria。研究发现菌株R-37产漆酶酶活明显高于菌株R-26和R-45。因此,将菌株R-37作为后续实验的研究菌株。⑵以R-37菌株为研究对象,研究了不同发酵培养基、碳氮源成分和培养条件对漆酶酶活的影响。研究发现菌株产漆酶的最佳发酵培养基成分为:葡萄糖20 g/L、蛋白胨10 g/L、CuSO4·5H2O0.10mmol/L、MgSO4·7H2O1.5 g/L、KH2PO43.0g/L、马铃薯浸汁200 g/L、VB10.01g/L。选取培养时间、培养温度和培养基的初始pH值进行中心组合设计及响应面优化实验,得出最优培养条件下(初始 pH6.22和30℃条件下培养5天)漆酶的酶活可达16.52±0.18U/mL。⑶通过研究漆酶性质,得出其最适温度为45℃,在25~45℃之间热稳定性最好;最适 pH为4.5,pH在4.5时漆酶的稳定性最好。漆酶对刚果红和结晶紫染料的脱色实验表明ABTS能显著提高染料的脱色率。无添加ABTS时,反应24 h漆酶对刚果红和结晶紫的脱色率分别为51.14±0.13%和33.42±0.17%;添加ABTS后,反应24 h漆酶对刚果红和结晶紫的脱色率分别为89.11±0.14%和75.34±0.27%。刚果红染料脱色的最适条件为:刚果红50 mg/L,ABTS浓度0.01 mmol/L,漆酶酶活为1.5U/mL,在35℃水浴、pH4.5条件下进行脱色反应4h,脱色率为96.33±0.13%。结晶紫染料脱色的最适条件是:结晶紫25mg/L,ABTS浓度0.01mmol/L,漆酶酶活为1.5U/mL,在35℃水浴、pH4.5条件下进行脱色反应8h,脱色率为81.36±0.28%。
其他文献
结合胡锦涛清华大学百年校庆讲话分析高校兼职班主任工作的意义、必要性以及工作中存在的困难和不足.
“思想政治工作是经济工作和其他一切工作的生命线”,好的思想政治工作思路和方法是思想政治工作得以顺利开展的基础和条件,所以,企业政工人员必须从实际出发,结合时代特点,
我国农村社会经济和政治的变迁,势必要求新时期的农村政治进行民主化改革.农村基层民主政治的发展,关键在于基层社会政治制度创新,即要重新调整乡村社会的权力配置,明确权责
“两学一做”学习教育活动开展以来,国网渭南供电公司主动作为、科学谋划、真学细做、严督实改,增强学习教育实效,积极营造学习教育的良好氛围,为深化“两个转变”和服务地方
高校德育教育工作的成败是衡量高校办学质量、制约高等教育发展的重要因素,高校德育工作的法治化建设与构建,既是培养高素质人才的需要,也是高校德育工作走向现代化的必然选
中华文明形成过程中的民族精神,奠定了民族精神发展的基础并不断创新,是中华民族赖以生存发展的精神支柱。因此弘扬和培育新时期的民族精神,对增强中华民族的凝聚力、向心力,
民生新闻作为一种新的新闻节目形式出现,受到了广大受众的喜爱。南京电视台的《南京零距离》、杭州电视台的《阿六头说新闻》、湖南都市频道的《都市一时间》都是享誉全国的
新时期加强辅导员队伍建设最为重要的途径就是实现高校辅导员的职业化,高校辅导员队伍职业化是确保大学生思想政治工作有效性的保障,也是目前高等教育改革的内在要求.可以说
21世纪的竞争,将不再是企业与企业之间的单体竞争,而是供应链与供应链之间的竞争,这是一个十分值得中国流通企业和制造企业关注的发展趋势.供应链管理(Supply Chain Manageme
营销管理是供电企业管理的重要组成部分,电力营销水平也将直接影响到电力施工水平。在供电企业面临形势日益复杂的背景下加强供电企业电力营销管理的研究具有重要意义,在实际工