【摘 要】
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司坦唑醇是一种重要的类固醇类激素。因其非法使用而臭名昭著,像其他合成的类固醇激素,司坦唑醇非法使用带来了一系列负面影响,如痤疮、肝脏和心脏衰竭,男性乳房发育症,睾丸萎缩及
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司坦唑醇是一种重要的类固醇类激素。因其非法使用而臭名昭著,像其他合成的类固醇激素,司坦唑醇非法使用带来了一系列负面影响,如痤疮、肝脏和心脏衰竭,男性乳房发育症,睾丸萎缩及不孕等。茶碱近几十年在临床上作为强有力的支气管扩张剂,茶碱的药理作用与其血浆浓度有密切的关系。当血浆药物浓度水平超过20μg/mL时,它会导致不良反应。 酶免疫分析法是一种理想的方法,可快速测定在生物或食物样本的各种残留,而基于辣根过氧化物酶的CLEIA具有高灵敏性。 采用CDI活化酯方法合成司坦唑醇、茶碱多克隆抗体,首次在几个不同类型的样品试验了ELISA及CLEIA方法的可行性。另外采用间接竞争ELISA测定血浆中浓度。考察抗体的效价、灵敏度和特异性等。 司坦唑醇结果如下,分析方法灵敏度为CLEIA>ELISA>HPLC。最优的CLEIA用于司坦唑醇的检测时,IC50和IC20分别为0.34 ng/mL和0.07 ng/mL。掺入司坦唑醇的保健品、食品和生物基质被应用于研究,平均回收率为92-113%,变异系数为8-13.5%。 茶碱的结果如下,多克隆抗体的效价为1:16000。在最优测定条件下,ELISA的检测范围为0.10-3.44μg/mL。茶碱检测极限为0.09μg/mL。在空白血浆回收率为91.97-102.70%。该方法的变异系数均低于15.35%。ELISA结果与HPLC-UV的相关系数为R2>0.91。偏差为15.7%。 通过本课题的研究,利用CDI法制备了司坦唑醇和茶碱的免疫原及包被抗原,并得到多克隆抗体。同一种抗体,CLEIA检测司坦唑醇比ELISA测定司坦唑醇抗体灵敏度高,并获得好的回收率和变异系数。对于茶碱,建立了在血浆中间接ELISA检测方法。结果证明ELISA可作为一种理想的筛选方法。
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