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猪鼻支原体（Mycoplasma hyorhinis,Mhr）和猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp）是引起猪支原体肺炎的重要病原体,能与多种病原体及环境因素协同作用,引起猪呼吸道疾病综合征（Porcine respiratory disease complex,PRDC）,导致病死率升高,给养猪业造成巨大经济损失。由Mhr和Mhp感染引起的疾病诊断,一般通过该病的流行特点、临床症状和剖检病理作出初诊,确诊需进行实验室检查。鉴于对Mhr与Mhp感染引起的疾病尚未研制出有效的鉴别诊断技术,此外两种病原感染猪后导致的致病性差异也未见比较性研究。本研究旨在建立一种能够鉴别这两种病原体的实验室诊断方法,同时对其致病性差异进行比较研究,为有效防控这两种病原引起的疾病提供技术手段。第一、以Mhr全菌体作为免疫原,采用杂交瘤技术获得了1株能稳定分泌抗Mhr菌体的特异性单克隆抗体（mAb）1C4,腹水经亲和层析纯化后标记辣根过氧化物酶（HRP）,建立了一种能够检测Mhr抗原的ELISA方法,该方法批内、批间变异系数均小于6%,抗原最低检出量为25 ng。第二、P37蛋白是Mhr重要的膜蛋白,在Mhr感染宿主过程中其重要作用,利用杆状病毒表达系统成功表达了重组的P37蛋白,制备了抗Mhr的mAb,IHC检测结果表明制备的mAb可用于感染肺组织中Mhr抗原的检测,并利用获得的mAb通过截短蛋白表达的方法识别了P37蛋白的最小B细胞线性核心表位为206KIKKAWNDKDWNTFRNF222,该表位由2个α螺旋和1个无规卷曲组成。第三、为了建立Mhr和Mhp抗原的鉴别诊断方法,采用Mhp全菌体及重组表达的Mhp-P46蛋白作为免疫原,制备了抗Mhp全菌体的mAb,对收集的腹水纯化后进行HRP标记,建立了一种能够检测Mhp抗原的IHC染色方法,该方法对肺组织中的Mhp抗原具有良好的反应原性,对已知的Mhr、猪圆环病毒2型（PCV2）抗原检测无交叉反应,可为Mhr与Mhp抗原的体内鉴别诊断和研究这两种病原的致病性差异提供可靠的技术手段。第四、为了调查Mhr和Mhp的致病性差异,采用Mhr-DL菌株和Mhp-HLJ菌株分别接种试验猪,通过临床表现、血清抗体检测、解剖病理及组织病理变化等指标进行了比较研究。病理剖检结果表明,Mhr接种组仔猪均出现多发性浆膜炎,胸腔内出现粘连;Mhp接种组仔猪肺组织出现不同程度的肉样变,未见纤维素性渗出物。免疫组化检测结果表明,Mhr和Mhp抗原在肺组织中分布不同,Mhr感染肺组织呈弥散性分布,而Mhp感染主要聚集在支气管粘膜表面。在实验条件下Mhr和Mhp接种猪均能引起不同的临床表现和病理变化,为Mhr和Mhp的致病机制研究提供了科学依据。