【摘 要】
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该研究首先进行了受体菌的筛选:对分离自成人粪便的三株大肠杆菌4623、4625、4626菌株进行药物敏感试验.结果三株菌对大多数药物耐药,进而考虑从儿童粪便中分离天然的不耐药
【出 处】
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中国预防医学科学院 中国疾病预防控制中心
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该研究首先进行了受体菌的筛选:对分离自成人粪便的三株大肠杆菌4623、4625、4626菌株进行药物敏感试验.结果三株菌对大多数药物耐药,进而考虑从儿童粪便中分离天然的不耐药、具粘附力和低毒力的大肠杆菌.从5个健康的、近期无腹泻的儿童粪便中分离出35株大肠杆菌,通过药敏试验筛选出较敏感的10株菌,通过对HEp-2细胞的粘附试验,LD<,50> 测定及对毒力因子基因SLT1、SLT2、HLY、eae的PCR试验,最后筛选出两株对抗生素敏感、具有较好的粘附力,不含上述毒力因子的大肠杆菌22、33株.使用该室构建的质粒-染色体致死平衡基因表达系统,作者对E.coli 22菌株进行了改造.通过接合转移的方法将含有1/3thyA基因缺失自杀质粒pJGX42转化入E.coli22.经过两次同源重组,筛选出了thyA基因缺陷的大肠杆菌突变株39,经传代40次,未见有恢复突变发生.作者将表达产毒性大肠埃希氏菌CFA/I菌毛的pJGX15E转入E.coli39,CFA/I基因在无抗生素存在条件下,在E.coli39中得到了良好表达,说明E.coli39能表达外源性基因,E.coli39有可能成为构建多价菌苗的受体菌.
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