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目的研究人胚胎干细胞H9与人肝癌细胞Hep G2共培养上清液对HepG2增值、迁移及凋亡的影响,并且探讨其可能机制。方法体外接触式共培养H9与HepG2,于共培养不同时间段后即12h、24h、36h、48h取得上清,离心后获得上清液,然后把不同时间不同浓度上清即20%、40%、60%、80%,作用于HepG2细胞,每日于倒置荧光显微镜下观察细胞的生长情况和形态变化;用MTS法检测不同浓度上清分别作用Hep G2细胞24h、48h后HepG2细胞的增值情况;应用流式细胞术检测Hep G2细胞的凋亡情况;用Hochest33258染色检测HepG2细胞的凋亡情况;Transwell小室法检测上清对HepG2细胞侵袭迁移的影响;基因芯片法检测上清作用HepG2细胞后,HepG2细胞表达谱的变化。结果不同浓度的共培养上清液均对HepG2细胞的增殖有一定的抑制作用,并且40%浓度及以上的浓度能明显促进肝癌细胞的凋亡,主要是早期和晚期凋亡,小室法也看出,上清对肝癌细胞的侵袭和迁移也具有明显的抑制作用,同时还能促进肝癌细胞HepG2的死亡,上清作用肝癌Hep G2细胞后的基因表达谱和基因功能都有明显的差异;同时,上清对正常的肝细胞LO2无明显的作用。结论胚胎干细胞与肝癌细胞HepG2共培养上清能够在体外明显抑制肝癌细胞HepG2的增殖、迁移和侵袭,并且促进其凋亡,并且具有浓度依赖性,共培养时间越长,上清浓度越高,抑制作用效果越好。说明肝癌细胞与胚胎干细胞共培养上清在体外对肝癌细胞Hep G2具有一定的抗肿瘤效应,具体机制待后续研究。