拟南芥ADH2基因的克隆及其对烟草与菊花的遗传转化研究

来源 :中山大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:A136C316
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究克隆了拟南芥(Arabidopsisthaliana)甲醛脱氢酶(FALDH)基因ADH2的全长cDNA,以质粒pBA002为基础,构建了表达载体(命名为pBA-ADH2)。将该表达载体利用根癌农杆菌转化烟草叶块与菊花茎段。 主要研究结果如下: 1.根据已发表序列设计特异引物扩增拟南芥基因ADH2全长cDNA,并且在上下游引物引入SpeⅠ和XhoⅠ酶切位点,以质粒pBA002为基础,构建了表达载体pBA-ADH2,并将该表达载体转化根癌农杆菌EHA105,为后续的遗传转化提供条件。 2.农杆菌EHA105介导表达载体pBA-ADH2转化烟草叶块,在含有Basta的培养基上筛选获得烟草拟转基因植株。对其中6株拟转基因植株的基因组DNA进行AtADH2基因的PCR检测分析,初步证明了AtADH2基因已经完整地整合到上述T0代烟草中。 3.探讨了菊花转基因体系的条件及其优化。结果显示选择剂Basta在4mg/L时可以完全抑止菊花幼苗的分化,因此确定以4mg/LBasta做为筛选剂的浓度;头孢曲松钠对菊花幼苗的生长有着抑制作用,而羧苄青霉素对其不但没有抑制作用,反而还会刺激其分化,因此本研究采用400mg/L的羧苄青霉素作为脱菌抗生素的浓度;在1/2MS+IBA0.1mg/L的培养基中,菊花幼苗的生根状况较好。但由于本研究以茎段为转化外植体,在筛选培养时因农杆菌嵌入到茎段深层维管束难以除尽而导致转化失败。
其他文献
本文通过对荣华二采区10
期刊
移动自组织网络(MANET)是由多个移动节点通过无线链路连接在一起的临时网络,不需要任何基建网络设施或者进行集中的管理。无线自组织网络的环境特点是:链路的任意改变,无线介质
自适应波束形成技术最早出现在声纳和雷达信号处理中,Capon自适应波束形成器是最典型的一种约束最佳自适应波束形成器。当存在阵列方向向量和阵列标度误差时,Capon波束形成器性
本文通过对荣华二采区10
期刊
甜菜夜蛾核多角体病毒(Spodopteraexiguanuclearpolyhedrosisvirus,SeNPV)可有效防治甜菜夜蛾(SpodopteraexiguaHübner)。目前中山大学昆虫学研究所利用该病毒已成功研制了甜
太阳自适应光学在进行波前处理时所使用的算法运算量巨大,然而太阳自适应光学系统又有着较高的实时性要求。如何利用现有技术设计出能够在大运算量条件下仍然满足太阳自适应光
本文通过对荣华二采区10
期刊
随着第三代通信技术(3G)的推广,无线带宽和传输速度都得到了大幅提升,为智能手机终端添加更多内容丰富的应用功能提供了良好的平台。本课题采用谷歌公司新推出一款基于Linux平台
本文综合应用现代分子生物学方法与技术,从核酸水平和蛋白质水平,对我国海洋珍稀物种青岛文昌鱼Bam32、TAPP基因进行较为系统的研究。以期阐明Bam32、TAPP在免疫系统进化过程中
词汇记忆的艺术是多样的,但只要通过适当的教学方法教会学生的词汇记忆,这样就会使教学取得较好的效果。