目的:通过克隆表达细粒棘球蚴微管蛋白,并进行药物相关作用研究,寻找在细粒棘球蚴的生命过程起重要作用、并可作为药物靶点的微管蛋白同型。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)对细粒棘球蚴微管蛋白同型的表达水平进行分析;采用原核表达系统及镍柱亲和层析法表达、纯化细粒棘球蚴微管蛋白 Tubulin-β4(EgTUB4)和 Tubulin-α9(EgTUA9)两个同型,并利用 SDS-PAGE进行鉴定;用浊度法检测微管蛋白溶液吸光值的变化以分析重组微管蛋白rEgTUB4和rEgTUA9的聚合效果并用透射电镜观察聚合产物的超微结构;将苯并咪唑类药物同重组微管蛋白共孵育,观察其对微管蛋白聚合反应的影响,同时用RT-PCR和Western blot法评价上述药物对细粒棘球蚴微管蛋白同型基因转录和蛋白表达的影响。结果:细粒棘球蚴的多种微管蛋白同型的表达水平各不相同,其中Tubulin-α5、Tubulin-α9、Tubulin-β2(EgTUB2)、Tubulin-β4(EgTUB4)和 Tubulin-β6(EgTUB6)等5个同型在原头节和囊壁组织中的表达水平均较高。原核表达得到rEgTUB4和rEgTUA9蛋白可在体外聚合形成类微管结构。虽然苯并咪唑类药物对rEgTUB4和rEgTUA9的体外聚合影响较小,但该类药物可影响细粒棘球蚴EgTUB基因(EgTUB2,EgTUB4andEgTUB6)的转录及蛋白表达。结论:本研究获得2个细粒棘球蚴微管蛋白(rEgTUB4和rEgTUA9)并实现体外聚合。上述蛋白的体外聚合对现有苯并咪唑类药物不敏感,提示EgTUB4可能不是该类药物的作用位点,但可能在寻找其它抗棘球蚴活性新结构的研究中发挥重要作用。