湖北省部分地区猪链球菌的分离鉴定和特性研究

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猪链球菌是一种重要的人畜共患病病原,该菌可导致猪关节炎、脑膜炎、败血症及支气管炎等,还可引起人类感染胸膜炎、败血症等,甚至死亡。近几年来,该病的发病率和死亡率有逐年上升趋势,而且危及到特殊从业人员的生命安全。根据菌体荚膜抗原特性的不同,可以分为35个血清型(1-34型及1/2型)其中又以2型致病性最强,其次是1、7、9和1/2型。猪链球菌的致病性与其致病因子间的相互作用密切相关。本试验针对湖北省部分地区猪链球菌血清型流行情况、毒力基因分布、耐药性和致病性等特点进行初步研究,主要完成了以下工作:1.采用ATB自动生化鉴定和PCR鉴定相结合的方法从来源于湖北省大冶、天门、监利等21个县市的病料中分离鉴定了30株猪链球菌,其中20株为猪链球菌7型,2株为猪链球菌9型,另外8株为非1型、2型的其他型。监利县主要流行血清型为7型,而且分离率较高,其次为阳新县、武汉市洪山区、红安县、天门市、武汉市汉南区,石首市主要流行血清型为9型,秭归县、松滋县等县市流行非1型、2型的其他型。2.对7型菌株cps7H基因部分序列、9型菌株的cps9H基因部分序列和其他未知血清型分离株gdh基因部分序列的克隆测序结果表明与世界其他地区大多数猪链球菌分离株的相应序列具有很高的同源性,同源性为98~100%,说明其变异程度不大,然而9型分离株与上海分离株的cps9H基因的同源性为61%,说明这些分离株之间cps9H基因的变异性较大。3.根据文献合成mrp、epf、sly、orf2、gdh、fpbs 6种毒力因子基因的引物,通过PCR检测表明,30株猪链球菌中3.3%为mrp+,33.0%为ipf+,16.7%为sly+,43.3%为orf2+fbps+,100.0%为gdh+。毒力因子基因分布特点与国内外报道有较大差别,具有区域性,结合小鼠致死性试验结果表明,不同分离株毒力差异较大,但存在对小白鼠具有较强致病性和致死性的分离株,包括7型分离株、9型分离株和非1型、2型的其他型分离株。4.病理学观察结果表明供试小鼠多呈急性败血症的症状,并伴随肾炎和肺炎及脾脏和淋巴结损伤,提示除报道较多的2型猪链球菌具有较强的致病性外,猪链球菌7型、9型和非1型或2型的其他血清型也起到一定的致病作用。5.药敏试验结果表明,湖北省的猪链球菌的耐药率较高,不同地区分离株耐药谱也不一致。猪链球菌分离株对目前最常用的一些药物,如奥索利酸、甲硝唑、泰洛星、林可霉素、四环素、链霉素等具有明显的耐药性,而对原始霉素、利福平、阿莫西林、A群青霉素、安普霉素、复方阿莫西林等具有较高的敏感性,该结果为临床用药选择提供了参考和依据。
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