CKAP2L在胰腺癌发生发展中的作用及机制研究

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目的:胰腺癌(Pancreatic cancer,PC)是一种恶性程度极高的肿瘤,且治疗选择相对有限。细胞骨架相关蛋白2样(Cytoskeletal-associated protein 2-like,CKAP2L)在胰腺癌细胞中高表达,但其在胰腺癌中的作用仍不清楚。为了研究CKAP2L在胰腺癌中的作用,我们敲低或过表达了CKAP2L的表达量,并采用体外和体内实验探索了其在胰腺癌中的作用。方法:采用免疫组织化学(Immunohistochemical,IHC)染色法检测108例组织样本中CKAP2L的表达情况。苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色用于观察胰腺癌组织中的组织学病变。免疫印迹(Western blotting,WB)和实时定量(Quantitative real-time,q RT)PCR用于检测胰腺癌细胞中的CKAP2L和MYC通路基因的表达情况。细胞计数试剂盒(Cell counting kit-8,CCK-8),5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,Ed U)和流式细胞仪检测用于观察细胞的增殖能力。采用Transwell迁移和Matrigel侵袭实验以分别检测细胞的迁移和侵袭能力。采用划痕实验检测细胞的愈合能力。最后,采用皮下移植实验分析体内肿瘤成瘤的情况;采用原位移植和磁共振成像(Magnetic resonance imaging,MRI)分析体内肿瘤的转移情况,并观察肝中胰腺癌细胞异种移植的转移情况。结果:CKAP2L的表达量在胰腺癌中上调,并与胰腺癌的临床生物学特性和患者预后呈负相关。CKAP2L的表达量上调显著促进了胰腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和愈合能力。相反,CKAP2L的表达量下调显著抑制了胰腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和愈合能力。同样,CKAP2L在裸鼠模型中显著抑制胰腺癌细胞的成瘤和原位肝转移能力。此外,CKAP2L的表达水平与MYC通路基因的表达呈正相关,包括Cyclin D1,CDK4,CDK6,MMP2和MMP9。而且,体外实验还证实了CKAP2L基因可以正调控MYC通路。结论:CKAP2L通过调节MYC通路促进胰腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和愈合能力。此外,CKAP2L促进了胰腺癌细胞的体内成瘤和肝转移。总之,我们的数据表明CKAP2L可能是临床上诊断胰腺癌患者有效的生物标志物。
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